[发明专利]手性胆甾类荧光探针及其用途

说明书

本发明利用具有荧光性质的胆甾类化合物作为荧光探针，采用差紫外光光度滴定法、荧光滴定法、Job法对酚酸、含氮碱基等分子识别配合能力及机制进行考察，同时建立了胆甾类荧光探针对食品中性分子的快速检测方法，为食品化学成分分析提供快速、简便的分析手段。

技术领域

本发明涉及手性胆甾类荧光探针。

背景技术

中性分子普遍存在于自然界中，例如有机酸广泛存在于食物中，具有软化血管、帮助消化吸收的作用，其中亚油酸是一种存在于多种食用油中的营养物质，但当人体摄入过量的亚油酸时会引起消化功能紊乱^[1]；酚酸具有抗氧化抑菌作用，其中的香草酸是去甲肾上腺素在外周神经系统代谢之后的物质，该物质升高往往提示神经母细胞瘤或者是肾母细胞瘤的存在^[2]；含氮碱基是组成遗传密码的基本单元，但人体内的嘌呤含量过多便会导致尿酸大量堆积，进而对肾脏造成巨大的危害，甚至引起痛风^[3]。采用传统方法检测这些中性分子时，不仅操作繁琐能耗大，而且难度高，因而需要开发专一性识别能力较强的主体化合物。

分子钳人工受体的合成与识别性能是近几年急需拓展的方向和领域。胆甾因具有刚性的凹面结构和固有的不对称性，是构筑人工受体结构的理想单元^[4]；可以根据实际需要对胆甾骨架中指向凹面中心的羟基进行不同的化学修饰，构筑成各种类型的分子钳人工受体^[5]；提供一个与客体分子恰好互补的微环境，从而通过氢键、π-π堆积和范德华力等非共价键作用力达到与底物的识别配合作用^[6]。再通过结构修饰对胆甾类化合物连接上具有荧光性质的基团，从而合成胆甾类荧光探针；其荧光性质可随环境的改变而灵敏变化^[7]。当识别受体与客体作用后，会引起物质荧光波长或强度发生改变，通过观察荧光信号的改变完成对分析物的检测^[8]。近年来，分子钳荧光探针的发展十分迅速，在新药设计、生物传感器以及分子器件等领域展示出了它独特的光彩^[6]。

利用胆甾类化合物对酚酸、含氮碱基进行检测，不仅能够提高检测的时效性，还能够更好地达到绿色检测的目的。

发明内容

本发明拟利用具有荧光性质的胆甾类化合物作为荧光探针，采用差紫外光光度滴定法、荧光滴定法、Job法对酚酸(包括有机酸、多酚类物质)、含氮碱基等中性分子识别配合能力及机制进行考察，同时建立了胆甾类荧光探针对食品中性分子的快速检测方法，以期为食品化学成分分析提供快速、简便的分析手段。

本发明提供了一种手性胆甾类荧光探针，其结构式如下：

本发明还提供了对食品或药品中酚酸的检测方法，它包括如下内容：

(1)待测样品，使用甲醇-有机酸混合溶液提取，提取物回收醇后，乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液，除去溶剂后，甲醇溶解并定容，作为供试品溶液；

(2)采用紫外分光光度滴定法、荧光滴定法、Job法中的一种进行测定。

其中，所述紫外分光光度滴定法具体包括：

取化合物7g和二甲基亚砜，配制浓度为1×10^-4mol·L^-1的主体分子钳溶液；取供试品溶液和二甲基亚砜，配成初始浓度为5×10^-3mol·L^-1的客体溶液；取2.5mL配制好的主体分子钳溶液于比色皿中，另一比色皿中加入2.5mL二甲基亚砜液作参比，测定所配制主体溶液的吸光度值；然后往主体分子钳溶液中不断加入一定量的客体溶液，与此同时二甲基亚砜溶液参比液中加入同浓度同体积的客体溶液，摇匀，最后测定各组溶液的吸光度值。

其中，所述荧光滴定法包括：