[发明专利]一种甘油磷酸胆碱及其异构体的高效液相色谱分析方法

权利要求书

1.一种甘油磷酸胆碱及其异构体的高效液相色谱分析方法，其特征在于包括以下步骤：

1)分别将配置好的对照品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱仪中，其色谱条件为：选用包被特殊薄膜并键PC基团的硅胶为填料的特殊色谱柱，柱温为30℃～45℃，选择乙腈为流动相A相，甲酸调节pH至3～5的水为流动相B相，流速为0.3～0.5ml/min，稀释剂为60％～75％的乙腈；

洗脱方式为等度洗脱，其中流动相A和流动相B的体积比＝4:1；

所述色谱柱采用规格为2.7μm,100mm×4.6mm的CAPCELL CORE色谱柱；

2)用通用型示差折光检测器RID检测器进行检测，检测器温度为25℃～40℃；

3)利用外标法计算供试样品中甘油磷酸胆碱及其异构体的含量；

所述异构体为L-β-甘油磷酸胆碱。

2.根据权利要求1所述的甘油磷酸胆碱及其异构体的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述流动相A相采用75％的乙腈并用甲酸调节pH为5.0。

3.根据权利要求1所述的甘油磷酸胆碱及其异构体的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述流速为0.5ml/min；柱温为40℃,运行时间为25min。

4.根据权利要求1所述的甘油磷酸胆碱及其异构体的高效液相色谱分析方法，其特征在于，供试品溶液和对照品溶液配制方法如下：

(1)取甘油磷酸胆碱对照品，用稀释剂溶解成浓度为1.0mg/ml的对照品溶液a；平行制备2份，分别标记为a1、a2；

(2)取甘油对照品，用稀释剂溶解成浓度为1.0mg/ml的对照品溶液b；

(3)取氯化胆碱对照品，用稀释剂溶解成浓度为1.0mg/ml的对照品溶液c；

(4)分别移取对照品溶液a1、b、c加稀释剂稀释成含各对照品分别为0.1mg/ml的混合对照品溶液d；

(5)取甘油磷酸胆碱样品，用稀释剂稀释成浓度为5.0mg/ml的溶液，标记为有关物质样品溶液A；平行制备2份，分别标记为A1、A2；

(6)精密移取溶液A1、A2用稀释剂分别稀释成浓度为1.0mg/ml的溶液作为供试品溶液，标记为B1、B2。

5.根据权利要求4所述的甘油磷酸胆碱及其异构体的高效液相色谱分析方法，其特征在于，还包括系统适应性测定：

1)分别取对照品溶液a1、b、c各20μl，注入高效液相色谱仪记录色谱图，以确定3种物质的保留时间；

2)取20μl混合对照品溶液d，注入高效液相色谱仪记录色谱图，记录3种物质的分离度及理论塔板数。