[发明专利]吖啶酯标记复合物和检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种吖啶酯标记复合物和检测试剂盒。该吖啶酯标记复合物包括本体、标记于本体上的标记基团、和连接于本体上的修饰基团，标记基团为吖啶酯类基团，修饰基团所带电荷与本体所带电荷为同性电荷。上述吖啶酯标记复合物用于免疫检测时，本底的发光值较小，信噪比较高，不容易出现假阳性。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，特别是涉及一种吖啶酯标记复合物和检测试剂盒。

背景技术

化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CLIA)，是用化学发光试剂直接标记抗体或抗原的免疫分析方法。常用的化学发光物质有吖啶酯类化合物，这类化合物在发光试剂(NaOH、H₂O₂)的作用下能迅速直接发光，在一秒内能完成闪烁发光且无须催化剂。

然而，在实际使用过程中，吖啶酯标记的抗原或抗体在免疫检测过程中的本底发光值偏大，信噪比较低，容易产生假阳性。

发明内容

基于此，有必要提供一种吖啶酯标记复合物，该吖啶酯标记复合物能改善免疫检测过程中本底的发光值偏大而使得信噪比较低的问题。

一种吖啶酯标记复合物，所述吖啶酯标记复合物包括本体、标记于所述本体上的标记基团、和连接于所述本体上的修饰基团，所述本体为抗AFP的抗体，所述标记基团为吖啶酯类基团，所述修饰基团所带电荷与所述本体所带电荷为同性电荷。

上述吖啶酯标记复合物的本体和修饰基团为同性电荷，增加了上述吖啶酯标记复合物所带电荷量。在使用时，与和上述吖啶酯标记复合物所带电荷为同性电荷的包被物配合进行免疫检测，由于上述吖啶酯标记复合物所带电荷与包被物所带电荷为同性电荷，它们之间的静电斥力使得上述吖啶酯标记复合物与包被物之间不容易产生非特异性吸附，从而使得本底的发光值较低，进而提升信噪比而使检测结果不容易产生假阳性。

在其中一个实施例中，所述标记基团来源于吖啶酯类化合物。

在其中一个实施例中，所述吖啶酯类化合物选自NSP-DMAE-NHS、NSP-DMAE-HEG-NHS和NSP-SA-NHS中的至少一种。

在其中一个实施例中，所述修饰基团来源于修饰剂，所述修饰剂选自水溶性磺酸基-Cy5-活性酯、4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐和磺基琥珀酰亚胺4-(N-马来酰亚胺基苯基)丁酸酯中的至少一种。

一种吖啶酯标记复合物的制备方法，包括以下步骤：

将修饰剂、本体和活化后的吖啶酯类化合物混合后反应，制备吖啶酯标记复合物，其中，所述吖啶酯标记复合物包括所述本体、标记于所述本体上的标记基团和连接于所述本体上的修饰基团，所述本体为抗AFP的抗体，所述标记基团来源于所述吖啶酯类化合物，所述修饰基团来源于所述修饰剂，所述修饰基团所带电荷与所述本体所带电荷为同性电荷。

在其中一个实施例中，包括以下步骤：

将所述修饰剂与所述本体混合，制备修饰后的本体；及

将所述修饰后的本体与所述活化后的吖啶酯类化合物反应，制备吖啶酯标记复合物。

一种检测试剂盒，包括上述的吖啶酯标记复合物。

在其中一个实施例中，所述检测试剂盒还包括固相载体和包被在所述固相载体上的包被物，所述包被物能与待测物质及所述吖啶酯标记复合物经免疫结合形成包被物-待测物质-吖啶酯标记复合物的夹心结构，所述包被物所带电荷与所述复合物所带电荷为同性电荷。

在其中一个实施例中，所述固相载体选自磁颗粒、玻片、微孔滤膜、设置有加样孔的板材及化学发光板中的一种。

在其中一个实施例中，所述检测试剂盒还包括校准品、稀释用缓冲剂、样本稀释剂、蛋白保护剂和发光底物中的至少一种。

附图说明