[发明专利]一种ZIF-8多肽复合纳米制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种ZIF‑8多肽复合纳米制剂，按照摩尔比包括：0.05‑0.06份低等电点的多肽，1份锌盐，35‑70份二甲基咪唑；低等电点pH包括：1‑1.5、1.5‑2、2‑2.5、2.5‑3、3‑3.5、3.5‑4、4‑4.5、4.5‑5、5‑5.5、5.5‑6、6.5‑7、7‑7.5；本发明的制剂仅用水作溶剂，无需有机溶剂，环保安全；通过本发明的方法合成得到的ZIF‑8多肽复合纳米颗粒具有均一的尺寸形貌，具有PH响应和高多肽负载率的优点。

技术领域

本发明涉及生物医药和药物制剂学领域，特别是一种ZIF-8多肽复合纳米制剂及其制备方法。

背景技术

个体化新抗原(neoantigen)癌症疫苗的开发和应用，已经成为癌症免疫治疗的一条新途径。然而，由于单一的裸肽疫苗只能产生较低的免疫原性。这是由于裸肽容易在体内被分解清除，并且被抗原递送呈细胞(APC)，例如树突状细胞(DC)吞噬递呈的效率低下。

ZIF-8是金属有机框架(MOFs)大家庭中常见的一种晶态多孔材料，它是由锌离子和二甲基咪唑有机配体通过配位键形成的三维网络结构。

ZIF-8属于纳米递送载体，纳米递送载体具有良好的生物相容性和独特的理化性质，能够有效地递送抗原，通过调控抗原在抗原提呈细胞内的呈递途径，在激发机体的体液免疫基础上，可以进一步激活抗原特异性的细胞免疫反应。

常见的纳米递送载体包括纳米脂质体、高分子纳米颗粒、无机纳米颗粒等。然而这些传统的纳米递送载体制备过程中常需要有机溶剂作溶剂，例如脂质体需要使用乙醇做溶剂，高分子PLGA纳米颗粒需要用丙酮或者氯仿等做溶剂，有机溶剂的生物安全性、环保性、纯化难度成为了不可少的考量因素。此外脂质体或者PLGA颗粒很难做到高多肽负载率，这会导致多肽药物产生较多的浪费，并且为后续的纯化带来了挑战。此外，当纳米颗粒被APC细胞吞噬之后，如何将递送的抗原分子释放到细胞质中也是一个极具挑战的问题。

ZIF-8本身具有高孔隙率、高比表面积，并且具有很好的生物安全性，因此它在生物领域(包括诊断、小分子载药等)具有广泛的应用。但是现有技术制备ZIF-8纳米递送载体通常需要使用有机溶剂，市场未开发出在水相中使用ZIF-8包裹多肽药物的方法，本发明解决这样的问题。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种ZIF-8多肽复合纳米制剂及其制备方法，仅用水作溶剂，无需有机溶剂，环保安全；合成得到的ZIF-8多肽复合纳米颗粒具有均一的尺寸形貌，具有PH响应和高多肽负载率的优点。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种ZIF-8多肽复合纳米制剂，按照摩尔比包括：0.05-0.06低等电点的多肽：1锌盐：35-70二甲基咪唑；低等电点pH包括：1-1.5、1.5-2、2-2.5、2.5-3、3-3.5、3.5-4、4-4.5、4.5-5、5-5.5、5.5-6、6.5-7、7-7.5。

前述的一种ZIF-8多肽复合纳米制剂，低等电点pH包括：3.5-4.5。

前述的一种ZIF-8多肽复合纳米制剂，锌盐包括：六水合硝酸锌、无水硝酸锌、无水醋酸锌、二水合醋酸锌、氯化锌、一水合硫酸锌、七水合硫酸锌、无水硫酸锌中的一种或多种。

前述的一种ZIF-8多肽复合纳米制剂，低等电点的多肽的序列包括：

DDD-VNYIKGFRYELYCLARTARTPLK-DDD SEQID01，等电点pH＝4.18；

Cy3-DDD-VNYIKGFRYELYCLARTARTPLK-DDD SEQID02，等电点pH＝4.18；

DDDDD-VNYIKGFRYELYCLARTARTPLK-DDDDD SEQID04，等电点pH＝3.67。