[发明专利]一种基于Cas14和链置换扩增的miR-21检测试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 202111495591.0 | 申请日： | 2021-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN114196752B | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 钱钧;张婷;张骞 | 申请（专利权）人： | 福州市讯刊生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 武汉谦源知识产权代理事务所(普通合伙) 42251 | 代理人： | 尹伟 |
| 地址： | 350000 福建省福州市闽侯县*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 cas14 置换 扩增 mir 21 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于Cas14a和链置换扩增的miR-21检测试剂盒，其特征在于，包括模板、Cas14a、sgRNA、报告单链DNA、DNA聚合酶和核酸内切酶；
所述sgRNA序列如SEQ ID NO:2所示；
所述模板包括三个结构域，依次为：miR-21结合结构域、内切酶识别切割结构域和Cas14a激活结构域；
所述模板的序列如SEQ ID NO:3所示。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸内切酶为Nt.BstNBI。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述模板、核酸内切酶、DNA聚合酶混合成预混液I，所述Cas14a、sgRNA和报告单链DNA混合成预混液II。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述预混液I中，还包括等温Amp缓冲液和dNTP。
5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述预混液II中，所述Cas14a与所述报告单链DNA的浓度比为1:5。
6.权利要求1-5中任一项所述的试剂盒在制备胆管癌诊断剂中的应用。
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