[发明专利]一种诊断流产的生物学标志物及其应用

说明书

本发明公开一种诊断流产的生物学标志物及其应用，属于生物技术领域。本发明首次发现α1,3甘露糖基化(α1,3mannosylation，Manα1,3Man)及α1,3甘露糖基转移酶(ALG3)在难免流产患者绒毛组织中高表达，将Manα1,3Man及α1,3甘露糖基转移酶(ALG3)作为诊断流产的生物学标志物，同时证明抑制Manα1,3Man及α1,3甘露糖基转移酶(ALG3)的表达会促进胚胎滋养层细胞的分化能力，并促进胎盘发育降低流产发生率。因此，本发明有助于流产的预测和诊断，并深入理解胎盘发育机制。为临床上以糖为靶点的流产诊断和治疗提供新的理论依据。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种诊断流产的生物学标志物及其应用。

背景技术

维持妊娠需要胚胎和胎盘的正常发育。当胚胎植入后，滋养层细胞经历自我增殖，同时分化为绒毛或绒毛外滋养层细胞。在人类胎盘中，有三种主要的滋养层亚群：细胞滋养层(CTB)、绒毛外细胞滋养层(EVT)和合胞体滋养层(STB)。在滋养层分化过程中，CTB细胞具有干细胞功能可进行两种不同的分化，一种是融合成多核的STB细胞，另一种是经历上皮间充质转化为EVT细胞。STB作为胎盘绒毛的外层是母体和胎儿之间气体和营养物质交换的主要场所。它分泌多种激素和蛋白质，保护胎儿免受病原体的侵害。EVT细胞是具有迁移和侵袭性的滋养层细胞，对胎盘的嵌入和胎儿发育至关重要。胎盘中这些细胞的增殖和分化在整个怀孕期间可能发生变化，以更好地适应胎儿发育的增长变化。异常的胎儿发育会导致多种妊娠疾病，包括流产、先兆子痫和宫内生长受限等。胎盘的正常发育需要复杂的调节机制，但人类胎盘发育的潜在机制还没有被详细的报道。

早期先兆流产占自然流产的80％。导致先兆流产的原因很复杂，与胚胎、母体和环境等因素有关，从病因学预防先兆流产较为困难，有效的控制先兆流产的发展对降低流产发生率具有重要意义。因此研究流产的指标对妊娠结局进行观测，可及时为保胎提供参考。例如，人绒毛膜促性腺激素(β-HCG，CGB)是由合体滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素，是妊娠的特异性标志物，HCG水平低、下降或者增长缓慢，可考虑妊娠异常。孕酮(P)是调节女性生殖的激素，母体血清孕酮值＜12.5ng/mL的先兆流产，B超检查结果多提示孕囊异常，不建议保胎。由于孕酮分泌呈脉冲样，导致判断的准确性有限。还有雌激素和抑制素A等，以上指标与流产有关，但对先兆流产临床诊断及预后的评估等方面的价值有限，因此有必要探讨新的指标联合以上指标应用于流产，具有一定的研究意义。

蛋白质具有多种翻译后修饰方式，包括糖基化修饰、磷酸化修饰和泛素化修饰等。糖基化是在膜蛋白和细胞分泌蛋白的氨基酸侧链上连接糖链，糖基化修饰分为N-糖基化修饰和O-糖基化修饰。N-糖基化修饰是在核心五碳结构(Manα1–6(Manα1–3)Manβ1–4GlcNAcβ1–4GlcNAcβ1-Asn-X-Ser/Thr)上形成多种结构的N连接聚糖。以此为基础分为高甘露糖型、复杂型和杂合型。高甘露糖型是在核心五碳的甘露糖上仅连接甘露糖。α1,3甘露糖基转移酶(ALG3)负责进入内质网腔内的第一个甘露糖基化的合成，即编码α-1,3甘露糖基转移酶在LLO的b分支将Man5GlcNAc2-PP-Dol转化为Man6GlcNAc2-PP-Dol。蛋白质的糖基化程度在特异的糖基转移酶的调控下可以改变蛋白质的理化性质和功能。在妊娠过程中，蛋白质糖基化参与多种生理过程，比如精卵识别、胚胎发育以及胚胎着床等。

发明内容

鉴于此，本发明的目的是提供了一种诊断流产的生物学标志物及其应用。

本发明目的是通过以下方式实现：

本发明提供一种诊断流产的生物学标志物，所述生物学标志物为Manα1,3Man或/和α1,3甘露糖基转移酶(ALG3)。

本发明另一方面提供Manα1,3Man或/和α1,3甘露糖基转移酶(ALG3)在制备诊断流产的试剂或试剂盒中的用途。