[发明专利]一种氟啶虫酰胺及其代谢物和嘧菌酯农药检测用试纸条及制备方法和检测方法

说明书

本发明涉及一种氟啶虫酰胺及其代谢物和嘧菌酯农药检测用试纸条及制备方法和检测方法，试纸条包括底板，底板上设置有样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜检测垫和吸水垫，样品吸收垫、结合物释放垫和吸水垫分别叠压在硝酸纤维素膜检测垫的两端上，样品吸收垫、结合物释放垫上分别包被有抗氟啶虫酰胺多克隆抗体、抗TFNA和TFNA‑AM多克隆抗体、抗TFNG和TFNG‑AM多克隆抗体、抗嘧菌酯多克隆抗体。本发明中的氟啶虫酰胺及其代谢物和嘧菌酯农药检测用试纸条基于竞争性时间分辨荧光免疫层析法，可同时对氟啶虫酰胺及四种代谢物和嘧菌酯农药残留进行半定量检测，具有检测所需样本量少、操作简单、检测背景信号低、灵敏度高以及特异性强且线性范围宽等优点。

技术领域

本发明涉及农药检测领域，尤其涉及一种氟啶虫酰胺及其代谢物和嘧菌酯农药检测用试纸条及制备方法和检测方法。

背景技术

氟啶虫酰胺(Flonicamid)，又名N-氰甲基-4-(三氟甲基)烟酰胺，是一种新型的有选择性的低毒吡啶酰胺类杀虫剂，对蚜虫等各种刺吸式口器害虫有效，该药剂通过阻碍害虫吮吸作用而致效，害虫摄入药剂后很快停止吮吸，最后饥饿而死。因为氟啶虫酰胺具有最小抵抗力交叉和哺乳动物急性毒性较低的特点，目前已被许多国家广泛使用在农作物上，如水稻、水果和蔬菜，用于控制蚜虫和其他刺吸式口器昆虫。氟啶虫酰胺作为一种较为新颖的杀虫剂具有广阔的未来市场，目前其单剂或复配制剂在我国的登记数量已达近三十种农作物。例如，专利号为ZL 201210119923.X(授权公告号为CN102696607A)的中国发明专利公开的氟啶虫酰胺微乳剂；申请号为CN201310722767.0(公开号为CN104719294A)的中国发明专利公开的含氟啶虫酰胺与烯啶虫胺的杀虫组合物等。

嘧菌酯(Azoxystrobin)是一种高效且广谱的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，对几乎所有真菌纲病害均有良好的活性。目前，嘧菌酯单剂及复配制剂在我国已被登记于黄瓜、苹果、水稻等多种农作物上。例如，申请号为CN201711164864.7(公开号为CN109805015A)的中国发明专利公开的含有氟啶虫酰胺和嘧菌酯的组合物等。

然而，氟啶虫酰胺和嘧菌酯均可携带到农产品中，并增加人类接触。为了保护消费者的健康，采用灵敏可靠的分析方法对氟啶虫酰胺的残留进行监测具有重要意义。近年来，许多氟啶虫酰胺残留的测定方法在不同类型的样本已被报道，这些方法包括气相色谱法(GC)、高效液相色谱(HPLC)和高效液相色谱质谱(HPLC-MS)。例如，申请号为CN202010953349.2(公开号为CN112114066A)的中国发明专利《共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中氟啶虫酰胺及其代谢物的方法》；专利号为ZL201510528547.3(授权公告号为CN105116090A)的中国发明专利《一种嘧菌酯检测方法》。

虽然这些方法具有很高的精度和灵敏度，但它们需要长时间的样品前处理程序和复杂的仪器分析程序，同时这些仪器也不适于大规模和现场分析。因此，要求采用更简单、更经济的方法来测定氟啶虫酰胺及其代谢物和嘧菌酯的残留量，而免疫分析正好满足这些要求，是筛选分析的可靠分析工具。此外，相对于酶联免疫吸附检测方法，荧光免疫层析技术是在荧光染料标记技术上发展起来的，作为一种免疫学检测方法，它是免疫亲和技术、免疫标记技术以及免疫层析技术的结合，具有快速、操作简便等优点。相对于传统标记物，荧光微球的发光强度可以随激发光的强度增强而增强，因此荧光微球标记有望提高免疫层析技术的检测限，而在微球壳结构的作用下，荧光微球具有相对稳定的形态结构，粒度均一、单分散性好、稳定性好、发光效率高、重复性好，有较好的生物相容性，形成微球后染料荧光猝灭大大减少，发射强而稳定，且基本不受外界环境介质变化的影响。因此荧光微球免疫层析技术同时具有检测灵敏度高、操作简便、稳定性好的优点，易于在基层普及和推广，可满足快速分析检测的需要，尤其适宜现场筛选和大量样品的快速分析。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是针对现有技术而提供一种灵敏度高、特异性强的氟啶虫酰胺及其代谢物和嘧菌酯农药检测用试纸条。