[发明专利]一种纳米酶抗菌水凝胶的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种纳米酶抗菌水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）壳聚糖-单宁酸的合成

将1-1.5g壳聚糖溶于质量浓度1%的乙酸去离子水100mL中，加入0.9-1.0g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和1-1.2g N-羟基硫代琥珀酰亚胺，在氮气保护下，搅拌45-60min，加入8-9g单宁酸，室温下搅拌10-12h，用0.1mol/L的Na₂CO₃或HCl调节pH为4.5-5.5，然后用3000-3500Da透析袋进行透析处理3天，冷冻干燥，即得单宁酸功能化的壳聚糖；

（2）将单宁酸功能化的壳聚糖溶于0.01mol/L、pH 7.4的磷酸盐缓冲液中，加入Cu,Fe-N-C纳米酶和50mmol/L H₂O₂溶液，并混合，37℃下搅拌30-40min，形成纳米酶抗菌水凝胶，其中单宁酸功能化的壳聚糖在混合物中的质量体积浓度为3-5%，Cu,Fe-N-C纳米酶在混合物中的终浓度为1-2mg/mL，H₂O₂溶液的添加量为混合物体积的0.05-0.2%；

所述Cu,Fe-N-C纳米酶是将0.1mmol的FeCl₂·4H₂O和0.1mmol CuCl·4H₂O溶于30mL无水乙醇中，然后慢慢加入1-3mmol的1,10-邻菲啰啉和30mL无水乙醇，搅拌30min，然后加入8-12g三聚氰胺，超声处理30min后，在40℃下搅拌直至溶剂蒸发，红色粉末在800-900℃、N₂保护下煅烧1-2h制得Cu,Fe-N-C；将Cu,Fe-N-C加到0.5mol/L的H₂SO₄溶液中在 80℃下孵育12h，离心，水洗涤3次，真空干燥，即得Cu,Fe-N-C纳米酶。

2.根据权利要求1所述的纳米酶抗菌水凝胶的制备方法，其特征在于：离心是在4000-6000r/min处理10-15min。

3.根据权利要求1所述的纳米酶抗菌水凝胶的制备方法，其特征在于：冷冻干燥分为两个阶段，预冻阶段：5h，温度-60℃；干燥升华阶段19h，-42.5℃~-39.5℃。

4.权利要求1-3中任一项所述的纳米酶抗菌水凝胶的制备方法制得的纳米酶抗菌水凝胶在制备伤口敷料中的应用。