[发明专利]一种急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法

权利要求书

1.一种急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，将实验动物置于低压低氧动物模型舱内饲养，其特征在于：所述建立方法包括以下步骤：

（1）升海拔阶段，真空泵组件的抽气速度大于补气组件的补气速度，使模型舱内的气压及含氧量降低，模拟升海拔从模拟海平面至8500米；

（2）维持高海拔阶段，真空泵组件的两个真空泵交替间隔12小时，以维持模型舱内氧气总量与模拟海拔8500米氧气总量相同，维持8500米高海满足实验要求的长时间运行，实验总时长达到216小时；

（3）降海拔阶段，真空泵组件的抽气速度小于补气组件的补气速度，使模型舱内的氧气总量不变，气压升高，模拟降海拔从高度8500米降至模拟海平面，海拔变化速率为0.45±0.04m/s。

2.根据权利要求1所述的急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，其特征在于，对动物模型通过以下方法中的两种以上进行实验验证：

（1）对动物模型进行¹⁸F-FDG心肌代谢显像验证心肌代谢改变；

（2）对模型进行小动物心脏超声实验验证心脏结构影像学改变；

（3）对模型进行FITC-BSA毛细血管渗漏实验；

（4）对模型心肌组织进行多种病理特殊染色实验；

（5）对模型的多模态验证，至少采用两组方法横向比较达到对心肌细胞损伤、炎症细胞浸润、血管渗漏、心肌纤维化程度的连续观察。

3.根据权利要求2所述的急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，其特征在于，对动物模型进行¹⁸F-FDG心肌代谢显像实验，包括以下步骤：

（1）配制¹⁸F-FDG工作液将¹⁸F-FDG原液稀释至0.5-1.2μCi/μL；

（2）麻醉动物模型，将¹⁸F-FDG工作液经尾静脉注射75-250μCi;

（3）注射¹⁸F-FDG工作液后30-120min上机进行PET/CT显像，勾画心脏感兴趣区，计算心脏SUVmean值；

（4）进行¹⁸F-FDG心肌代谢显像连续实验，动物模型心肌代谢显像随时间增长SUVmean值先逐渐升高，以后逐渐降低。

4.根据权利要求2所述的急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，其特征在于：使用FITC-BSA对动物模型进行心肌组织冰冻免疫荧光病理显像，包括以下步骤：

（1）配置0.5-2.0ug/μL的 FITC-BSA溶液，经尾静脉注射50-200μL；

（2）间隔2～4小时后解剖留取动物模型心脏组织行冰冻切片；

（3）在荧光显微镜下动物模型的血管外组织间质荧光增强。

5.根据权利要求2所述的急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，其特征在于：多种病理特殊染色实验检查动物模型的心肌改变包括：

HE染色、Masson染色、免疫组化CD163染色和免疫组化CD34染色验证动物模型的心肌细胞损伤、进行性纤维化、巨噬细胞浸润和新生毛细血管增生情况。

6.根据权利要求2中所述一种急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，其特征在于：¹⁸F-FDG心肌代谢显像联合小动物心脏超声对动物模型进行心脏结构与功能检测。

7.根据权利要求2中所述的一种急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，其特征在于：¹⁸F-FDG心肌代谢显像联合FITC-BSA血管渗漏实验、心肌CD34免疫组化染色验证动物模型心肌毛细血管渗漏。

8.根据权利要求2中所述的一种急性高原低压低氧心肌损伤动物模型建立方法，其特征在于：¹⁸F-FDG心肌代谢显像、小动物心脏超声、心肌HE染色和心肌Masson染色验证动物模型存在随时间加重心肌纤维化表现。