[发明专利]一种猪脾转移因子的生产方法及产品

说明书

本发明属于生物制品制备领域，涉及一种猪脾转移因子的生产方法及产品。一种猪脾转移因子的生产方法，包括：清洗、粉碎、冻融、酸沉、絮凝步骤；冻融一次后，使用生物酶酶解处理猪脾原料。本发明提供的猪脾转移因子的生产方法，采用酶解法来代替传统方法中的多次冻融，操作简单，处理时间短，只需一次冻融，避免反复冻融造成的转移因子产率低、不稳定，同时，采用酶解处理，得到的转移因子产品生物活性更高。

技术领域

本发明属于生物制品制备领域，涉及一种猪脾转移因子的生产方法及产品。

背景技术

 转移因子(transfer factor，常简写为TF) 是存在于致敏淋巴细胞内与迟发型超敏反应有关的一类可透析小分子物质，可使供体的细胞免疫性转移给受体正常的淋巴细胞，使其具有供体的细胞免疫性，为免疫调节剂。在人，畜，禽中都有应用。

现有技术的转移因子制备方法普遍是将动物脾脏进行绞碎、破坏细胞结构使胞内转移因子释放到浆液中，再将浆液中的转移因子进行分离精制最终得到转移因子产品。该方法存在操作时间长，易污染，有效成分不稳定等缺点。其他破碎细胞的尝试包括超声法等，这些方法在成本，时间、生物活性上各有不足。

动物脾脏浆液成分复杂，因此动物TF不易分离纯化；动物TF分子量一般在3～15KD，属于小分子多肽，不含蛋白质。不同动物和不同抗原特异性TF的分子量、肽分子大小和氨基酸种类略有差别等。鉴于以上特点，转移因子的质量较大程度上受制备方法和工艺的影响，选取合适的制备工艺对提高转移因子的品质至关重要。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明提供一种猪脾转移因子的生产方法，该方法采用酶法处理猪脾样品，可以在较短的时间内高效完成样本的裂解，所生产产品有良好的生物学效果。

本发明解决其技术问题采用的技术方案是：一种猪脾转移因子的生产方法，包括：清洗、粉碎、冻融、絮凝步骤；其中，冻融一次后，使用酶酶解处理猪脾原料。

优选地，所述的酶为蛋白酶和/或半纤维素酶。

优选地，所述的酶为蛋白酶和β-甘露聚糖酶。

优选地，所述酶解处理猪脾原料的步骤中，每千克猪脾原料所需酶的用量是：6万U的蛋白酶和5万U的β-甘露聚糖酶。

优选地，所述的蛋白酶为酸性蛋白酶或碱性蛋白酶。

优选地，酸性蛋白酶的酶解条件为pH5.0，40℃，酶解8小时。

优选地，碱性蛋白酶的酶解条件为pH8.0，40℃，酶解8小时。

优选地，在酶解处理后还包括酸沉步骤，所述酸沉中使用浓盐酸调节pH至 pH4.0。

优选地，所述絮凝步骤中使用0.2%的壳聚糖作为絮凝剂。

本发明还提供了使用上述方法制备的猪脾转移因子产品。

本发明提供的猪脾转移因子的生产方法，采用酶解法来代替传统方法中的多次冻融，操作简单，处理时间短，只需一次冻融，避免反复冻融造成的转移因子产率低、不稳定，同时，采用酶解处理，得到的转移因子产品生物活性更高。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面结合具体实施例，对本发明进行更详细的说明。给出了本发明的较佳的实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本说明书所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明公开内容的理解更加透彻全面。

本发明下述实施例中，使用的主要原料和试剂介绍如下：

猪脾脏：采购自申请人所在地的生猪养殖屠宰企业；有结果对比的实验中尽量使用同一批次，至少为同一来源的猪脾脏；使用前保存于-20℃下。