[发明专利]TNFSF15蛋白在促进骨髓干细胞分化为巨噬细胞并扩增中的用途

说明书

本发明提供一种TNFSF15蛋白在促进骨髓干细胞分化为巨噬细胞并扩增中的用途，使用TNFSF15蛋白获取巨噬细胞后，再过继治疗相关疾病，为日后临床巨噬细胞相关疾病治疗提供新的思路。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种TNFSF15蛋白在促进骨髓干细胞分化为巨噬细胞并扩增中的用途。

技术背景

巨噬细胞是机体重要的固有免疫细胞，具有高度可塑性，它被发现在各种组织中，例如破骨细胞(骨)，肺泡巨噬细胞(肺)，小胶质细胞(脑)，组织细胞(结缔组织)，枯否细胞(肝脏)和朗格汉斯细胞(皮肤)等，且表现出功能的多样性。他们在生长发育、维持代谢平衡、组织修复和免疫反应中均有着重要的作用。研究发现注射巨噬细胞对急性心肌梗死后的心脏重构具有促进作用；向脑内移植一种能吞噬无用物质或有害蛋白质的小胶质细胞(巨噬细胞)，可减少导致阿尔兹海默症的β淀粉样蛋白等。因此，可通过移植巨噬细胞的方式治疗多种疾病。但由于机体本身的免疫功能，对外来物种的排斥反应，注入的巨噬细胞最好来自个体本身。因此如何在尽可能不影响机体健康，又可大量获得机体自身的巨噬细胞是一个重要的研究方向。骨髓干细胞是巨噬细胞的一个重要来源，利用骨髓干细胞的增殖特性，和现有可分离骨髓细胞的技术，可将骨髓细胞取出体外诱导骨髓干细胞向巨噬细胞分化从而获得大量巨噬细胞。目前诱导骨髓干细胞向巨噬细胞分化的细胞因子主要有M-CSF和IL34，由于它们促进分化的巨噬细胞具有特定表型，应用于多种疾病模型中具有局限性，因此寻找新的促进骨髓干细胞向巨噬细胞分化的蛋白是十分重要的课题。

肿瘤坏死因子超家族成员15(Tumor necrosis factor superfamily-15，TNFSF15，又称TL1A)，是一种主要由成熟血管内皮细胞分泌的血管生长抑制因子。研究发现它不仅是一种血管负调控因子，能够抑制肿瘤内血管新生和肿瘤生长；还可作为一种免疫激活剂，促进T细胞活化和树突状细胞成熟。目前，尚未有关于TNFSF15蛋白在骨髓干细胞向巨噬细胞分化中作用的报道。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种TNFSF15蛋白促进骨髓干细胞在体外分化为巨噬细胞并增殖中的用途，以解决上述现有技术存在的不足，该蛋白能促进骨髓干细胞向巨噬细胞分化，增加巨噬细胞数量，为巨噬细胞相关疾病提供治疗方案。

为了达到上述目的，本发明的技术方案是：

本发明的第一方面，提供一种TNFSF15蛋白在制备用于促进骨髓干细胞分化为巨噬细胞并扩增的药物或制剂中的用途。

优选的，在该用途中，所述药物或制剂通过促进骨髓干细胞向巨噬细胞分化，增加巨噬细胞的比例。

优选的，在该用途中，所述药物或制剂通过促进骨髓干细胞/骨髓源巨噬细胞增殖，增加巨噬细胞的数量。

在该用途中，TNFSF15蛋白能够独立或在其他相关巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF/GM-CSF)存在时促进骨髓干细胞向巨噬细胞的分化。

本发明的第二方面，提供一种应用TNFSF15蛋白在体外诱导骨髓干细胞向巨噬细胞分化并扩增的方法，所述方法中使用的扩增培养基中添加有浓度不高于10μg/mL的TNFSF15蛋白。

优选的，所述方法包括如下步骤：

从小鼠骨髓中取出骨髓细胞，用含有RPMI 1640、15％FBS和TNFSF15蛋白培养基重悬，调整细胞浓度为2×10⁶mL,加入孔板(六孔板)中，每孔2mL，于孵箱中培养3-7d，培养条件为37℃，5％CO₂。

优选的，所述方法中的扩增培养基的组成为RPMI 1640、15％FBS和3μg/mLTNFSF15蛋白。

在体外培养过程中检测到TNFSF15蛋白在骨髓干细胞分化过程中，提升巨噬细胞的比例，且呈现时间和浓度依赖性。