[发明专利]一种肿瘤微环境细菌探针及其在基于成像质谱流式技术的肿瘤微环境细菌检测中的应用

权利要求书

1.一种肿瘤微环境细菌探针，其特征在于，所述探针是由镧系金属阳离子、双功能聚合物和肿瘤微环境细菌抗体组成的金属标记的细菌抗体探针，所述双功能聚合物的第一末端为二乙基三胺五乙酸DTPA且第二末端为顺丁烯二酰亚胺功能基团，所述肿瘤微环境细菌抗体的靶标物质包括革兰氏阴性菌细菌壁成分脂多糖LPS、革兰氏阳性菌细菌壁成分磷壁酸LTA。

2.如权利要求1所述的一种肿瘤微环境细菌探针，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：

步骤1、制备聚合物基镧系金属螯合物：利用双功能聚合物第一末端中的二乙基三胺五乙酸DTPA基团螯合镧系金属阳离子生成聚合物基镧系金属螯合物MCPs(Ln)；

步骤2、在肿瘤微环境细菌抗体中加入三氯乙基磷酸酯TCEP，对细菌抗体上的二硫键进行还原，得到暴露巯基的细菌抗体；

步骤3、将步骤1中获得的聚合物基镧系金属螯合物MCPs(Ln)与步骤2中获得的暴露巯基的细菌抗体反应，其中，所述聚合物基镧系金属螯合物MCPs(Ln)第二末端的顺丁烯二酰亚胺功能基团与所述暴露巯基的细菌抗体的-SH基团发生迈克尔加成反应，合成金属标记的细菌抗体探针，即所述肿瘤微环境细菌探针。

3.如权利要求2所述的一种肿瘤微环境细菌探针，其特征在于，所述步骤1中双功能聚合物的聚合度DP，决定所述聚合物基镧系金属螯合物MCPs(Ln)中金属离子的数量。

4.如权利要求3所述的一种肿瘤微环境细菌探针，其特征在于，所述聚合物镧系金属螯合物MCPs(Ln)聚合度DP为20-25。

5.如权利要求2所述的一种肿瘤微环境细菌探针，其特征在于，所述镧系金属阳离子为¹⁶⁵Ho阳离子。

6.如权利要求1-5中任一项所述的一种肿瘤微环境细菌探针在基于成像质谱流式技术的肿瘤微环境细菌检测中的应用，其特征在于，使用所述肿瘤微环境细菌探针通过免疫组化成像技术IHC对待测肿瘤组织切片样品进行标染，再利用成像质谱流式技术IMC对标染后的样品进行检测，用于检测细菌探针的靶标物质，进一步分析待测肿瘤组织切片中的微环境细菌。

7.如权利要求6所述的一种肿瘤微环境细菌探针在基于成像质谱流式技术的肿瘤微环境细菌检测中的应用，其特征在于，所述待测肿瘤组织为乳腺癌组织。

8.如权利要求6所述的一种肿瘤微环境细菌探针在基于成像质谱流式技术的肿瘤微环境细菌检测中的应用，其特征在于，所述分析待测肿瘤组织切片中的微环境细菌为针对肿瘤微环境中的细菌进行定性、定量和定位分析。