[发明专利]一种小球藻的培养方法

说明书

本发明涉及微藻培养技术领域，特别涉及一种小球藻的培养方法。本发明以金鲳鱼蒸煮液作为培养小球藻的主要营养物质，明显促进了小球藻的生长，添加醋酸、海盐和硝酸钠之后，促进作用更加明显，同时大大提高了小球藻中多不饱和脂肪酸的含量，使得培养获得的小球藻营养价值更高，可广泛用于保健品、食品的制备。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种小球藻的培养方法。

背景技术

小球藻是绿藻门(Chlorophyta)、小球藻属(Chlorella)中的一种广泛分布在池塘、湖泊、海洋中的单细胞藻类，细胞呈球形或广椭圆形，大小因种类而有所不同，通常直径为3-8微米。小球藻富含蛋白质、脂肪、碳水化合物、多种维生素及其他生物活性物质，可作为人类食品或动物饲料，具有较为广阔的开发利用前景。小球藻不仅蛋白质含量丰富，且构成小球藻蛋白质的必须氨基酸占总氨基酸的42％；多糖在小球藻中的含量仅次于蛋白质，约占干重的20％，多糖具有调节机体免疫的功能；小球藻在缺氮、高光条件下能够大量积累脂肪酸，其中诸如亚油酸、亚麻酸等长链不饱和脂肪酸的含量丰富，这些是人和动物必需的不饱和脂肪酸。

小球藻的营养方式包括自养、异养及兼养，因此其培养方式也具有多样性，可以分为自养培养、异养培养和混合培养，因此科学家可以根据不同的实验目的采用不同培养方式。目前，小球藻的培养方法较为繁琐，受各种条件的影响，生长速率不够理想，因此，需要提供一种能够明显促进小球藻生长同时提高多不饱和脂肪酸含量的培养方法，将培养获得的小球藻广泛用于制备保健品、食品。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种小球藻的培养方法，该方法能够明显促进小球藻的生长，提高小球藻中多不饱和脂肪酸的含量。

一种小球藻的培养方法，包括：

收集金鲳鱼的蒸煮液，经预处理，获得培养液；

将培养液稀释后调节pH至7～9，收集对数中期的小球藻离心，取沉淀的藻种接种于稀释后的培养液中，初始培养的OD₇₅₀为0.5，培养5～8天。

所述预处理包括：

将金鲳鱼的蒸煮液用纱布过滤，离心取上清液；

收集上清液分级过滤后，经121℃高压蒸汽处理20min，冷却至室温。

一些实施方案中，所述稀释的倍数为4～8倍，优选为8倍。

本发明提供的培养方法还包括在稀释的培养液中添加醋酸的步骤。

一些实施方案中，所述醋酸的添加量为至培养液中醋酸的浓度0.25～2g/L。在一些具体实施例中具体可为2g/l、1g/l、0.5g/l、0.25g/l。

一些实施方案中，所述培养的温度为15～35℃，优选为23℃。

一些实施方案中，所述培养的光照条件为：24小时光照，光照强度为50～250μmol·photons·m^-2·s^-1，培养期间每天定时手动摇晃3次。其中，光照强度优选为250μmol·photons·m^-2·s^-1。

一些实施方案中，本发明提供的培养方法在添加所述醋酸同时，还包括添加海盐和硝酸钠的步骤。

其中，所述海盐的添加量为至培养液中盐度为17.5～70‰，优选为52.5‰；所述硝酸钠的添加量为至培养液中N：P＝10～25:1，优选为15:1。

实验表明，本发明以金鲳鱼蒸煮液作为培养小球藻的主要营养物质，适当添加醋酸和海盐，明显促进了小球藻的生长，同时大大提高了小球藻中多不饱和脂肪酸的含量，使得培养获得的小球藻营养价值更高，可广泛用于保健品、食品的制备。

附图说明