[发明专利]抗表皮生长因子受体抗体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种抗人表皮细胞生长因子(EGFR)抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，其中，所述的重链可变区具有CDR1区、CDR2区和CDR3区，所述重链可变区的CDR1区、CDR2区和CDR3区包含

当由IMGT编号系统定义时，分别与SEQ ID NOs：1、2和3；或

当由Kabat编号系统定义时，分别与SEQ ID NOs：9、10和11；或

当由Chothia编号系统定义时，分别与SEQ ID NOs：14、15和11；或

当由Contact编号系统定义时，分别与SEQ ID NOs：16、17和18所示的具有至少85％,86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％相同的氨基酸序列；

所述的轻链可变区具有CDR1区、CDR2区和CDR3区，所述轻链可变区的CDR1区、CDR2区和CDR3区包含

当由IMGT编号系统定义时，分别与SEQ ID NOs：4、5和6；或

当由Kabat或Chothia编号系统定义时，分别与SEQ ID NOs：12、13和6；或

当与Contact编号系统定义时，分别与SEQ ID NOs：19、20和21所示的具有至少85％,86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％相同的氨基酸序列。

2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，所述的重链可变区和轻链可变区包含分别与SEQ ID NOs:7和8具有至少85％,86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％相同的氨基酸序列。

3.如权利要求1或2中所述的抗体或其抗原结合片段，进一步包含免疫球蛋白恒定区，可选的是人IgG的恒定区。

4.如权利要求1-3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其具有以下一个或多个特征，

(1)特异性结合至人EGFR胞外结构域(ECD)，通过ELISA检测其EC50值不超过1nM，优选的是不超过0.5nM，更优选的是不超过0.05nM；

(2)与其它人ErbB受体酪氨酸激酶不具有交叉反应活性，所述其它人ErbB受体酪氨酸激酶包括HER2、HER3和/或HER4；

(3)对表达EGFR的肿瘤细胞增殖活性具有抑制作用，通过ELISA检测所述抗EGFR抗体或其抗原结合片段对肿瘤细胞的IC50值不超过5nM，优选不超过1nM；

(4)与人EGFR胞外结构域(ECD)结合亲和力常数(KD)数值不超过1×10^-9M，优选的KD值不超过5×10^-10M。

5.如权利要求1-4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，可以是小鼠、人、嵌合或人源化抗体。

6.一种核酸，其编码权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。

7.一种表达权利要求6所述核酸的表达载体。

8.一种宿主细胞，其包含权利要求6所述的核酸或权利要求7所述的表达载体。

9.一种使用权利要求8所述的宿主细胞制备权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的方法，其包含以下步骤(1)在所述的宿主细胞中表达所述抗体或其抗原结合片段，和(2)从所述的宿主细胞或细胞培养物中分离所述的抗体或其抗原结合片段。