[发明专利]一种便于使用的组织工程角膜上皮植片及其制备、应用方法

说明书

本发明提供一种便于使用的组织工程角膜上皮植片，属于眼科治疗材料领域，所述植片包括支架，以及与所述支架凹面贴合的角膜缘上皮干细胞，以及贴合在所述角膜缘上皮干细胞上的羊膜，以及贴合在所述羊膜上的角膜缘微环境细胞。本发明可使患者无需手术，仅通过简单的类似佩戴隐形接触镜的方式，将植片放置于角膜上即可实现角膜缘上皮及其微环境的移植重建，从而治疗角膜缘干细胞缺乏，促进缺损的角膜上皮愈合，减少角膜组织的瘢痕形成。

技术领域

本发明涉及医疗用品领域，具体涉及眼科治疗材料，尤其涉及一种便于使用的组织工程角膜上皮植片。

背景技术

角膜上皮位于角膜最前端，是一类分层的、非角化的鳞状上皮组织，具有4-6层细胞，约占整个角膜厚度的10％，是角膜抵御外界损伤的重要防线，也对维持角膜的透明起到至关重要的作用，角膜上皮受损后，可能会造成各种角膜疾病，甚至导致失明。

角膜缘干细胞缺乏症是致盲性疾病，并发症有角膜上皮缺损甚至穿孔，角膜缘干细胞缺乏的病因多样，是多种眼表疾病的终末结局，患者可因角膜上皮迁延不愈、持续的炎症反应和组织破坏导致角膜穿孔、视力下降甚至视力丧失，严重影响患者的生活质量。

角膜缘干细胞移植是治疗角膜缘干细胞最为有效的治疗手段，但受限于传统思想，捐献角膜的数量十分有限，远远不能满足临床需求，导致患者等待时间长、延误治疗。

为解决此问题，组织工程角膜上皮是一个有效的方案，现已有多种组织工程技术构建角膜上皮，但目前还存在许多不足：首先，只单纯移植角膜缘上皮干细胞，未对角膜缘上皮干细胞生存的微环境进行重建，移植后的干细胞难以在患者的眼表持续增殖更新，容易导致移植失败；其次，移植方式操作复杂、耗时长，对手术设备的要求较高，需在设备齐全的医院才能够进行移植手术；最后，既往组织工程角膜上皮在移植过程中需要缝合，不可避免地对眼部组织造成损伤。

发明内容

鉴于目前角膜缘干细胞移植手段的匮乏，以及现有移植方式治疗效果有限、创伤较大、操作复杂，本发明提供一种使用方便、可多次治疗的新型组织工程角膜上皮植片，同时提供其制备方法。

本发明的目的采用以下技术方案来实现：

一种便于使用的组织工程角膜上皮植片，包括支架，以及与所述支架凹面贴合的角膜缘上皮干细胞，以及贴合在所述角膜缘上皮干细胞上的羊膜，以及贴合在所述羊膜上的角膜缘微环境细胞。

优选的，所述支架为生物支架或合成支架。

优选的，所述支架为角膜接触镜。

优选的，所述支架的直径为14.0-14.5mm，凹面曲率半径为8.4-8.8mm。

本发明的目的之二在于提供一种前述的组织工程角膜上皮植片的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

S1、从捐献眼或患者对侧健眼获得一定大小的角膜缘组织，通过消化法将角膜缘组织的上皮层与基质层分开，并进一步消化分离分别得到角膜缘上皮干细胞和角膜缘微环境细胞；

S2、将所述角膜缘上皮干细胞培养于所述支架的凹面，待所述角膜缘上皮干细胞增殖至铺满支架凹面，制备得到组织工程角膜上皮；

S3、将所述角膜缘微环境细胞培养于所述羊膜表面，待所述角膜缘微环境细胞增殖至能够铺满所述羊膜全部表面，得到组织工程角膜缘微环境；

S4、将所述组织工程角膜缘微环境的羊膜面贴附在所述组织工程角膜上皮的凹面，获得所述组织工程角膜上皮植片。

本发明的目的之三在于提供一种前述的组织工程角膜上皮植片的使用方法，所述使用方法包括以下步骤：

(1)清洗双手；

(2)取出保存于干细胞培养基中的组织工程角膜上皮植片，凹面向上置于右手食指上；