[发明专利]一种颗粒中性蛋白酶及其制备方法

权利要求书

1.一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：

1)种子培养：将枯草芽孢杆菌菌种接入斜面培养基，在温度为30～37℃条件下培养20～24h，然后将培养好的斜面菌种接入种子培养基，在温度为30～37℃的恒温摇床中培养20～24h，得到种子发酵液；

2)发酵培养：将培养好的种子发酵液加入发酵培养基，在温度为30～37℃的发酵罐中培养30～37h，得到终发酵液；

3)提取：将终发酵液转入回收罐，经絮凝、超滤浓缩后获得液体中性蛋白酶；

4)制粒干燥：将液体中性蛋白酶和载体按比例混合湿法制粒，低温干燥制成颗粒中性蛋白酶产品。

2.根据权利要求1所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述斜面培养基的配方为：蛋白胨0.8～1.1％，酵母膏0.4～0.6％、氯化钠0.3～0.6％；所述种子培养基的配方为：蛋白胨0.8～1.1％，酵母膏0.4～0.6％、氯化钠0.3～0.6％。

3.根据权利要求2所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，步骤1)中，在恒温摇床中培养中不断搅拌通风，搅拌速度为280～300转/分钟，通风量为1.0～1.2/立方气体/培养液。

4.根据权利要求1所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述发酵培养基的配方为：豆粕5.2～8.3％、玉米粉4.5～7.5％、玉米浆干粉0.3～0.5％、磷酸二氢钾0.1～0.3％、磷酸氢二钾0.1～0.3％、氯化钠0.15～0.2％、硫酸镁0.1～0.2％、硫酸锰0.02～0.05％，pH值6.5～7.0。

5.根据权利要求4所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，在发酵培养中不断搅拌通风，搅拌速度为280～300转/分钟，通风量为1.0～1.2/立方气体/发酵液。

6.根据权利要求1所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，步骤3)中，添加絮凝剂硅藻土和珍珠岩进行絮凝，硅藻土和珍珠岩添加量分别为终发酵液体积的2.5～4.5％和1.5～3％。

7.根据权利要求1所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，步骤3)中，采用截留分子量为8000的超滤膜进行超滤浓缩。

8.根据权利要求1所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，步骤4)中，所述载体为麦芽糊精和玉米淀粉，添加质量比例为液体中性蛋白酶：麦芽糊精：玉米淀粉为4～5:1～2:3～5。

9.根据权利要求1所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法，其特征在于，步骤4)中，在65～70℃的流化床设备中低温干燥30～40min。

10.权利要求1～9任意一项所述的一种颗粒中性蛋白酶的制备方法制备的颗粒中性蛋白酶。