[发明专利]一种包封DL-薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种包封DL‑薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子及其制备方法与应用，是以PLGA纳米粒子为载体，在其中同时包封有DL‑薄荷醇和双氯芬酸。本发明的纳米粒子具有增强HIFU热效应、降低肿瘤细胞的热抵抗能力并减轻HIFU术后的炎症反应的功能，而且可以有效抑制肿瘤的糖酵解，可用于制备治疗肿瘤的HIFU增敏剂。

技术领域

本发明属于纳米材料技术领域，具体涉及一种用于增强HIFU热效应并缓解术后炎症治疗肿瘤的包封DL-薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子及其制备方法和应用。

背景技术

癌症是严重威胁人类健康的主要疾病之一，其主流治疗方法有手术、放射治疗、化疗三大模式。但是，由于肿瘤、宿主、治疗方法三者之间有着极复杂的相互关系，导致这三种方法治疗后癌症易复发、转移或出现新病兆，降低了癌症的最终治疗效果。因此，发展新型的癌症治疗技术可以弥补当前临床治疗技术的不足，有望提高癌症患者的生存期和生存质量。其中HIFU(高强度聚焦超声)热消融疗法用于肿瘤的非侵入式治疗已经受到研究者的广泛关注。HIFU通过高能量的超声准确定位到深部的目标靶区，瞬间的高温及空化效应使得靶区的组织蛋白变性，从而引起病变组织的坏死。然而HIFU穿过人体组织照射到靶区的能量衰减可能会导致肿瘤的残留，而多次的照射使得靶区产生炎症，不利于术后的恢复并可能导致癌症的转移。为了解决这一问题，发展高性能的HIFU增敏剂有利于HIFU热消融治疗在临床上的应用。

与正常细胞不同，部分癌细胞通过糖酵解产生充足的腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)和生物成分，以满足肿瘤快速代谢的需要。这样的代谢途径需要高速率的葡萄糖摄取，这在很大程度上依赖于肿瘤细胞上调的葡萄糖转运体(Gluts)。其中一个典型的代表是Glut1，它在肿瘤细胞中普遍过表达。因此，通过特异性抑制Glut1来剥夺肿瘤细胞内的葡萄糖，从而抑制肿瘤细胞内的葡萄糖代谢，进而减少代谢产物(如乳酸盐和ATP)的产生。ATP是生物体最重要和不可缺少的能量来源，细胞内产生足够的ATP对细胞生长和蛋白质合成至关重要。大量研究表明细胞内ATP损耗可以阻断细胞内热休克蛋白的产生。这意味着具有降低ATP能力的肿瘤特异性Glut1抑制剂在肿瘤细胞中诱导HSP耗竭，有望克服肿瘤细胞的热抵抗。

此外，大量研究证实，原发肿瘤部位炎症引起的炎症因子(例如TNF-α,IL-6,IL-1β)水平的上调，促进了肿瘤的生长、转移和复发。在癌症热疗过程中高温照射后肿瘤细胞死亡，细胞内活性氧释放，免疫细胞会浸润并释放大量细胞因子，使照射部位面临炎症和感染的风险。

目前还未有纳米材料增强HIFU的非炎性肿瘤治疗的应用。用临床常用的抗炎药物和小分子糖酵解抑制剂双氯芬酸(DC)与相变材料DL-薄荷醇同时装载在PLGA纳米粒子中，在HIFU的照射下实现HIFU的非炎性肿瘤治疗具有重要的研究和应用价值。

发明内容

为解决HIFU手术在热疗过程中的能量衰减导致的肿瘤组织残留、术后炎症等问题，本发明构建了一种包封DL-薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子。

本发明为解决技术问题，采取如下技术方案：

本发明首先公开了一种包封DL-薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子，其是以PLGA纳米粒子为载体，在所述PLGA纳米粒子中同时包封有DL-薄荷醇和双氯芬酸。所述包封DL-薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子的粒径为340～460nm。

本发明得所述包封DL-薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子的制备方法为：

(1)将80-100mg PLGA粉末和40-60mg DL-薄荷醇溶于3-5mL CH₂Cl₂中，加入0.8-1.2mL溶有20-40mg双氯芬酸的DMSO溶液，所得混合液加入到20-30mL质量浓度为1.5-2％的PVA溶液中，超声获得乳状液；

(2)将所述乳状液置于室温下搅拌4-6h，然后离心、水洗，即获得包封DL-薄荷醇和双氯芬酸的PLGA纳米粒子(DC/DLM@PLGA NPs)。