[发明专利]知母皂苷AⅢ的制备方法

说明书

本发明涉及知母皂苷AⅢ的制备方法，属于天然提取物制备领域。知母皂苷AⅢ的制备方法，将破碎后的知母与水混合，在40～60℃下保温至少12h，即将知母中的知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ；或将知母皂苷BⅡ、破碎后的知母和水在40～60℃下保温至少12h，即将知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ。本发明方法简单、成本低。

技术领域

本发明涉及知母皂苷AⅢ的制备方法，属于天然提取物制备领域。

背景技术

知母为百合科植物知母的根茎，知母Anemarrhena asphodeloides Bunge，为多年生草本。全株无毛。根茎横生，粗壮，密被许多黄褐色纤维状残叶基，下面生有多数肉质须根。叶基生，丛出，线形，长20-70cm，宽3-7mm，上面绿色，下面深绿色，无毛，质稍硬，叶基部扩大包着根茎。花葶直立，不分枝，高50-120cm，下部具披针形退化叶，上部疏生鳞片状小苞片；花2-6朵成一簇，散生在花葶上部呈总状花序，长20-40cm；花黄白色，干后略带比色，多于夜间开放，具短梗；花被片6，基部稍连合，2轮排列，长圆形，长5-8mm，宽1-1.5mm，先端稍内折，边缘较薄，具3条淡绿色纵脉纹；发育雄蕊3，着生于内轮花被片近中部，花药黄色，退化雄蕊3，着生于外轮花被片近基部，不具花药；雌蕊1，子房长卵形，3室，花柱短，柱头1。蒴果卵圆形，长10-15mm，直径5-7mm，成熟时沿腹缝线上方开裂为3裂片，每裂片内能常具1颗种子。种子长卵形，具3棱，一端尖，长8-12mm，黑色。花期5-8月。果期7-9月。主产于河北、山西、陕西、内蒙古等地。具清热泻火，滋阴润燥之功效，为中国药典历版所收载品种。

知母药材化学成分主含皂苷。含总皂苷约6％，从中检出6种皂甙苷，分别称为知母皂苷A-Ⅰ，A-Ⅱ，A-Ⅲ、A-Ⅳ、B-Ⅰ和B-Ⅱ，其中知母皂苷B-Ⅱ即是原知母皂苷A-Ⅲ(prototimosaponinA-Ⅲ)，知母皂苷A-Ⅲ即是知母皂苷(zhimrsaponin)A，又是知母皂苷(anemarsaponin)A1，是萨尔萨皂苷元与知母双糖结合而成的双糖苷，知母皂苷A-Ⅰ是萨尔萨皂苷元β-D-吡喃半乳糖苷。此外还有马尔考皂苷元、新芰脱皂苷元。尚含多量的还原糖和粘液质、鞣酸、脂肪油等。另含芒果苷约0.5％。

知母所含皂苷中知母皂苷BⅡ的含量最高，《中国药典》2020版规定知母药材含知母皂苷BⅡ不少于3.0％；文献报道(不同产地知母药材中芒果苷和知母皂苷BⅡ的含量测定，中国实验方剂学杂志，2010年第16期49-51页)药材中含知母皂苷BⅡ多在5％左右，最高测得含量达10.25％。

知母皂苷BⅡ为呋甾皂苷元；知母皂苷AⅢ为螺甾皂苷元，是知母皂苷BⅡC-22位脱羟基、C-26糖链脱葡萄糖基而成。用传统的酸水解方法将知母皂苷BⅡ水解为知母皂苷AⅢ，反应强烈，条件不容易控制，且C-3糖链容易脱糖而水解为菝葜皂苷元。

随着提取、分离、纯化等技术的发展和应用，目前，国内外对知母各种皂苷及其苷元的研究日渐广泛深入。如授权发明专利ZL201210234803.4公开了一种知母皂苷AⅢ的制备方法。该方法将市售的中药知母饮片或者新鲜采集的知母根茎或须根为原料，采用醇提、酶解、萃取、树脂及硅胶柱层析、结晶组合工艺制得知母皂苷AⅢ。文献报道知母皂苷AⅢ具有抗血小板聚集、改善学习能力和记忆力、降血糖和抗肿瘤等作用，对肝癌、乳腺癌、宫颈癌等肿瘤细胞的增殖具有抑制作用，如授权发明专利ZL201610637699.1提供了一种用于抑制肝癌、黑色素瘤和乳腺癌等多种恶性肿瘤的TAⅢ脂质体。

发明内容

本发明解决的第一个问题是提供一种不外加任何试剂试药，工艺简单的将知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ的方法。

知母皂苷AⅢ的制备方法，将破碎后的知母与水混合，在40～60℃下保温至少12h，即将知母中的知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ；或，将知母皂苷BⅡ、破碎后的知母和水在40～60℃下保温至少12h，即将知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ。