[发明专利]一种CEPro722启动子及其应用

说明书

本发明涉及农业生物技术领域，尤其涉及一种CEPro722启动子及其应用。所述CEPro722启动子包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。本发明经过研究，在GRMZM2G069722基因中筛选发现了CEPro722启动子，该启动子可以驱动基因在例如水稻、小麦或玉米等植株中表达；尤其是在植物愈伤组织、营养生长期的叶片，幼穗及种子等各组织中高效稳定的表达，可替代非植物源启动子。本发明提供的CEPro722启动子在植物的基因工程领域有重要意义，可有效降低外源DNA引起的转基因植物的潜在安全风险。

技术领域

本发明涉及农业生物技术领域，尤其涉及一种CEPro722启动子及其应用。

背景技术

转基因技术已经成为研究基因功能的基础研究应用研究领域不可或缺的技术之一，启动子作为驱动基因表达的重要功能顺式作用元件，在转基因技术中占据重要地位。启动子按其表达方式可分为组成型启动子、诱导型启动子和时空特异型启动子三类。组成型启动子能够在所有或大多数组织中启动基因转录，使基因表达具有时空持续性和表达恒定性。诱导型启动子能够在某些物理或化学信号的刺激下启动或大幅提高基因表达量，它们具有增强子、沉默子或类似功能的序列结构，并表现出明显的专一性。时空特异型启动子只在特定的生长阶段或部位中启动基因表达。深入研究启动子的表达模式既有利于理解基因的表达调控机制和生物学功能，又有助于有效调控外源基因的表达。

目前，在植物转化过程中应用较多的启动子主要是花椰菜花病毒的启动子(CaMV35Spro)和玉米多聚泛素蛋白基因启动子(ZmUbipro)。CaMV35Spro是植物DNA病毒的启动子，在应用于植物转基因中时，可能引起不必要的担忧；ZmUbipro虽然来源于植物，但在转化时频繁使用同一种启动子易导致转基因沉默。因此，挖掘新的高效的组成型启动子，尤其是植物本源的、生物安全低风险的启动子在显得尤其重要。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明提供一种CEPro722启动子及其应用。

本发明提供一种CEPro722启动子，所述CEPro722启动子包括如下任一核苷酸序列：

i)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；

ii)与i)互补的核苷酸序列；

iii)如i)所示的核苷酸序列经取代、缺失、增加一个或多个核苷酸序列得到的具有同等启动子功能的核苷酸序列。

本发明进一步提供用于扩增权利要求1所述的CEPro722启动子的引物对，包括：如SEQ ID NO.3-4所示的引物对，和/或如SEQ ID NO.5-6所示的引物对。

进一步地，如SEQ ID NO.3-4所示的引物对用于扩增如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列；如SEQ ID NO.5-6所示的引物对用于扩增如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列。

本发明进一步提供包含所述CEPro722启动子的生物材料，所述生物材料为表达盒、载体或转基因细胞。

进一步地，当所述生物材料为表达盒时，所述表达盒还包括功能基因和终止子。

进一步，所述功能基因为植物农艺性状相关基因或标记基因。

标记基因，即可以起到特异性标记作用的基因，通常用于检验基因转化成功与否，优选为β-葡萄糖苷酸酶基因GUS、潮霉素磷酸转移酶基因Hn、乙酰乳酸合酶突变基因ALS、Bar基因、抗性EPSPS基因或NptII基因中的一种或多种。

植物农艺性状，即和农作物的生育期、株高、叶面积、果实重量、品质、除草剂抗性、病虫害抗性等可以代表作物品种特点的相关性状。相应的，植物农艺性状相关的基因即是和这些性状相关的基因。