[发明专利]猪瘟病毒E2次单位疫苗组成物

说明书

本发明公开了一种猪瘟病毒E2次单位疫苗组成物，其可利用真核表现系统表现出E2重组蛋白后，结合CpG佐剂及双相佐剂所得的猪瘟病毒E2次单位疫苗组成物，仅须单剂接种即可提供有效免疫保护力，毋需补强免疫。

技术领域

本发明涉及一种动物病毒的重组蛋白及其应用，特别涉及一种单剂接种的猪瘟病毒E2次单位疫苗组成物。

背景技术

典型猪瘟(Classical swine fever；CSF)又称古典猪瘟，是一种感染猪只的高传染性疾病。一般而言，猪只高烧、厌食、腹泻、神经症状、全身红斑、大量死亡、母猪流产或产下死猪崽，即须考虑猪瘟的可能性。

CSFV于1903年首次被发现后，一直在亚洲、非洲、欧洲、中南美洲地区流行着，一旦爆发疫情常造成养猪产业重大的经济损失，影响全球经济，因此列为世界动物卫生组织(OIE)表A(List A)的疾病之一，属必须通报的动物传染病。据文献指出1948年在东亚的猪瘟发生率曾达81.3％。此病毒流行的国家必须使用常规疫苗接种来预防和控制病源传播，2017年181个OIE会员国中，已有32个国家被认为没有猪瘟病毒的散播。如果疫苗使用得当，即能限制猪瘟传播、预防疾病爆发并在未感染猪群中建立完整的保护性免疫，避免严重猪只死亡及经济损失。

典型猪瘟的病原为典型猪瘟病毒(Classcal Swine fever virus；CSFV)，属于黄病毒科(Flavivirdae)瘟疫病毒属(Pestivirus)。CSFV基因组为单股正股RNA，全长约12300个碱基，可转译成3898个氨基酸并形成多聚蛋白(polyprotein) 后，再由病毒和细胞蛋白酶加工成四种结构蛋白(C、Erns、E1和E2)和八种非结构病毒蛋白(Npro、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)。 CSFV套膜上的结构蛋白E1蛋白和E2蛋白都属于糖蛋白，是入侵宿主细胞的重要角色。因此，在开发CSFV次单位疫苗时，经常选择E2蛋白作为抗原的重要决定位。

目前疫苗为控制所有疾病的最佳策略。防治猪瘟的疫苗主要分为两种：活毒(减毒)疫苗及次单位(死毒)疫苗。活毒疫苗广泛用于猪瘟流行地区，以现阶段猪瘟疫苗的开发而言，猪瘟组织疫苗已逐步取代传统的兔化猪瘟疫苗。过去研究发现猪瘟病毒的核酸序列只有E2基因与中和抗体的产生密切相关，因此以生物技术生产特异猪瘟E2蛋白质成为重要开发议题。

E2次单位疫苗除了产生具有保护作用的猪瘟中和抗体，更可以满足DIVA(differentiate infected from vaccinated animal，能区分出受野外病毒感染与疫苗接种的动物)对疫苗接种的要求。以目前市售E2次单位疫苗(例如拜耳E2次单位疫苗)为例，其包含杆状病毒感染昆虫细胞生产的E2重组蛋白以及油包水型佐剂。在免疫动物时，市售E2次单位疫苗每次使用剂量为2mL(含60μg的 E2重组蛋白)，间隔3周后再补强免疫。

市售E2次单位疫苗除了有效增加猪只抗体之外，也克服习知活毒疫苗无法满足DIVA的缺点，进而用于区别诊断试剂中，藉此鉴别野外病毒的感染，加速猪场内潜在猪瘟病毒的清除，有助于对猪瘟清除的推行。

然而2005年的文献指出，东亚部份地区近二十年间流行的猪瘟病毒只基因亚群从3.4亚群转变成2.1a亚群，亟需提升猪瘟疫苗的免疫保护力。

发明内容

因此，本发明的一态样是提供一种猪瘟病毒E2次单位疫苗组成物，其包含E2重组蛋白、CpG佐剂以及双相佐剂，所得的疫苗组成物仅须单剂接种，不需补强免疫即具有完整免疫保护力。

根据本发明的上述态样，提出一种猪瘟病毒E2次单位疫苗组成物。此猪瘟病毒E2次单位疫苗组成物包含E2重组蛋白、CpG佐剂以及双相佐剂，其中E2重组蛋白的一氨基酸序列为如序列识别号(SEQ ID NO):1所示。

在上述实施例中，前述E2重组蛋白可例如为源自于猪瘟病毒株2.1a亚群。