[发明专利]一种钙离子通道阻断药物的检测方法在审
申请号: | 202111560143.4 | 申请日: | 2021-12-20 |
公开(公告)号: | CN114371154A | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
发明(设计)人: | 吴寒曦;徐睿航;贾睿;于殿江;魏双艳;翟玉凤 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N1/28 |
代理公司: | 北京盛凡佳华专利代理事务所(普通合伙) 11947 | 代理人: | 李冲 |
地址: | 201306 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 离子 通道 阻断 药物 检测 方法 | ||
1.一种钙离子通道阻断药物的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、Neuro-2a使用高糖HDMEM培养基在六孔板中培养24小时,设立空白、损伤、加药组;
S2、倒掉HDMEM培养基,加入含GV-58的培养基处理三小时,激活钙离子通道,细胞内钙离子浓度上升,建立损伤模型;
S3、再加入不同浓度的ω-芋螺毒素GVIA阻断钙离子通道使细胞内钙离子浓度下降;
S4、钙离子荧光探针,处理一小时,PBS冲洗,胰蛋白酶消化2分钟,收集离心,使用荧光分光光度计检测480nm激发波长下的发射波长,与空白组比较,计算相对细胞内钙离子浓度。
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