[发明专利]异嗜性抗体阻断剂HBR-7及其制备方法

说明书

本发明公开了一种异嗜性抗体阻断剂HBR‑7及其制备方法，异嗜性抗体阻断剂HBR‑7单体IgG，包括轻链和重链，其中，轻链的3个互补决定区CDR序列分别为，CDR1：STGAVTTINFA，CDR2：GTGNQYIN，CDR3：ALENYSWWV；重链的3个互补决定区CDR序列分别为，CDR1：GSIFGYTGYTM，CDR2：PYLIGNTLS，CDR3：AYRDGYFDY。本发明筛选出异嗜性抗体阻断剂HBR‑7单体IgG，并获得其重链和轻链可变区，测序后得到其独特的核苷酸序列，采用戊二醛法将单体IgG交联获得聚合型HBR‑7，具有良好异噬性抗体阻断效果。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，特别涉及一种异嗜性抗体阻断剂HBR-7及其制备方法。

背景技术

阻断剂是一种能消除免疫测试干扰的试剂。免疫测试干扰大部分是由病人样本中异噬性抗体和试剂溶液中检测用抗体之间产生非特异性交叉结合引起的，异噬性抗体即为人抗动物免疫球蛋白抗体(如human anti-mouse antibody,HAMA)，这类异噬性抗体在免测测试中会导致错误的检测结果。

异噬性抗体会导致“假阴性”或“假阳性”检测结果，尤其在双抗体夹心法检测方法中。在样本中没有目标分析物质时，异噬性抗体可能会结合检测用抗体，形成假阳结果，在样本中存在目标分析物质时，被异噬性抗体检测用抗体可能因为空间位阻无法与目标分析物结合，形成假阴结果。

消除异噬性抗体干扰的常用方法为添加异噬性抗体阻断剂。在免疫诊断试剂盒中添加高效纯化鼠IgG是消除由HAMA造成干扰的一种有效方法，同时为了提高阻断效果，将单体鼠IgG交联获得交联型IgG聚体可有效地提高阻断效果。

阻断剂市场用量非常大，常用的鼠IgG大规模纯化方法为硫酸铵分级沉淀法，辛酸-硫酸铵法或亲和法，其纯化方法较为粗犷，纯化出的鼠IgG存在规模放大、纯度、稳定性等问题，且操作较为复杂。将单体IgG变为聚体IgG的方法有物理方法和化学方法，物理方法常采用高温处理、低pH处理等，这类方法可控性差、形成聚体能力有限且对抗体有一定的损害，因此使IgG抗体多聚化的方法多为化学方法，即利用一些化学试剂与抗体氨基酸残基上的羧基或氨基反应，通过形成分子间共价键将IgG单体交联成聚体，常用的化学试剂有1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、双琥珀酰亚胺辛二酸酯(DSS)、戊二醛等试剂。通过化学交联形成的IgG多聚体会大幅度提高鼠IgG对检测样本中异噬性抗体干扰的消除能力。

本发明采用戊二醛法对单体IgG进行交联获得聚合型HBR-7。

发明内容

为了解决现有技术中的问题，本发明提供了一种异嗜性抗体阻断剂HBR-7及其制备方法，异嗜性抗体阻断剂HBR-7具备良好阻断异噬性抗体干扰能力，其单体鼠IgG包括其可变区的氨基酸序列和核苷酸序列。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种异嗜性抗体阻断剂HBR-7，异嗜性抗体阻断剂HBR-7单体IgG，包括轻链和重链，其中，

轻链的3个互补决定区CDR序列分别为，

CDR1：STGAVTTINFA，

CDR2：GTGNQYIN，

CDR3：ALENYSWWV；

重链的3个互补决定区CDR序列分别为，

CDR1：GSIFGYTGYTM，

CDR2：PYLIGNTLS，

CDR3：AYRDGYFDY。