[发明专利]一种许氏平鲉IL-6重组蛋白、可溶表达方法及应用有效
| 申请号： | 202111568274.7 | 申请日： | 2021-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN114057897B | 公开（公告）日： | 2023-01-13 |
| 发明（设计）人： | 齐鑫;闫少静;李昀;温海深;王孝杰;左陈鹏;吕里康 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K14/54;C07K1/22;C12N15/70;C12N15/24;C12N1/21;A01K61/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京奇眸智达知识产权代理有限公司 11861 | 代理人： | 吴小平 |
| 地址： | 266075 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 许氏平鲉 il 重组 蛋白 可溶 表达 方法 应用 | ||
1.一种许氏平鲉IL-6重组蛋白，其特征在于，所述许氏平鲉IL-6重组蛋白包括IL-6成熟肽氨基酸序列、N端的促溶短肽以及C端6×组氨酸标签；
所述IL-6成熟肽氨基酸序列为SEQ ID NO：2。
2.一种如权利要求1所述的许氏平鲉IL-6重组蛋白的表达载体，其特征在于，所述表达载体包括所述IL-6重组蛋白的编码基因和骨架质粒，所述骨架质粒由pET-32a(+)改造得到。
3.一种表达如权利要求1所述的许氏平鲉IL-6重组蛋白的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌包括所述表达载体。
4.如权利要求3所述的许氏平鲉IL-6重组蛋白的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌的宿主菌选自Rosetta-gami B(DE3)。
5.一种如权利要求1所述的许氏平鲉IL-6重组蛋白的可溶表达方法，其特征在于，所述许氏平鲉IL-6重组蛋白的可溶表达方法包括以下步骤：
(1)构建所述IL-6重组蛋白编码基因后，连到骨架质粒上构建得到IL-6重组蛋白的表达载体；
(2)将所述表达载体转化到宿主菌中，诱导表达IL-6重组蛋白；
(3)基于所述IL-6重组蛋白的His标签亲和层析分离得到IL-6重组蛋白；
(4)将纯化得到的蛋白溶液透析至1×PBS，加入牛血清白蛋白，-80℃保存；或脱盐后冻干，-20℃保存。
6.如权利要求5所述的许氏平鲉IL-6重组蛋白的可溶表达方法，其特征在于，所述步骤(4)中的牛血清白蛋白BSA的终浓度为0.1％。
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