[发明专利]一种复合微生物菌剂及在贝母提质中的应用

说明书

本发明属于微生物和生物技术领域，具体涉及一种复合微生物菌剂及在贝母提质中的应用。所述复合微生物菌剂包括微杆菌DGWGJ‑1、小叶微杆菌BM‑1、氧化微杆菌BM‑2；进一步还包括圆褐固氮菌GSICC30112；所述复合微生物菌剂不仅保留了原有菌剂的功能特征，而且显著提高了2年生和4年生贝母药效成分总生物碱含量，促进了茉莉酸的积累，对于贝母的提质具有显著的促进作用，可用于制备贝母提质调节剂、提质专用肥等，具有广阔的应前景。

技术领域

本发明属于微生物和生物技术领域，具体涉及一种复合微生物菌剂及在贝母药效品质提升中的应用。

背景技术

甘肃贝母是百合科贝母属多年生草本植物，为“国家二级重点保护野生植物”。作为名贵药材“川贝”基原植物之一，其鳞茎具有清热润肺、化痰止咳之功效。甘肃贝母野生资源主要分布于甘肃武都、舟曲、玛曲、岷县、榆中等地海拔2 800～4400m的灌丛或草丛中，喜寒凉、湿润和肥沃土壤，忌高温、强光直射，对环境的要求苛刻。由于传统人工种植模式从播种到形成商品药材需要4-5年时间，周期长，成本高，开发药效增益菌剂，实现快速优质生产势在必行。

“品质优先，兼顾产量”是药材种植的基本原则。近年来，生态种植模式已发展成为中药栽培生产的主要模式。中药生态农业对产地环境的要求及投入品的要求与有机农业相同，栽培过程中坚持“六不用”原则，即不能使用化学合成的化肥、农药、农膜、除草剂、激素及转基因种子，应综合应用立体种植技术、农作物病虫害生物防治技术、设施农业技术、有机肥料与农作物秸秆的循环高值利用技术、现代微生物技术、抗性品种选育技术等开展种植工作，其产品的安全要求达到有机产品标准(郭兰萍等，中药生态农业最新进展及展望)。

道地药材的“逆境效应”表明，植物积累次生代谢产物所需的适宜生境与其生长发育的适宜生境可能并不一致，甚至相反，药用植物在长期面临某些特定胁迫时，会通过合成和积累特定次生代谢产物而对环境胁迫进行防御，因而适度的环境胁迫可能诱导次生代谢产物的累积(黄璐琦等，环境胁迫下次生代谢产物的积累及道地药材的形成)。植物受到环境胁迫，会激活水杨酸、茉莉酸等胁迫相应內源激素的表达，研究表明，颠茄中內源SA，JA的增加，能够提高次生代谢产物莨菪碱和东莨菪碱含量(山雨思等，外源茉莉酸甲酯和水杨酸对盐胁迫下颠茄生理特性和次生代谢的影响)；喷施200μmol·L^-1的外源茉莉酸甲酯，促进钩藤苗鲜重、干重增长，生物碱积累(路星星等，茉莉酸甲酯对钩藤生物碱合成的影响)；地黄在受到内生真菌侵染后，通过诱导JA相关合成酶，增加JA含量，激活植物抗逆基因的表达，并且加速梓醇及毛蕊花糖苷等次生代谢的合成(彭淑萍等，响应内生菌侵染的两个地黄茉莉酸合成关键基因的克隆与表达分析)；外源JA可诱导杭白菊叶片保护酶活性增强，提高内源JA和黄酮类、酚类化合物含量(樊婕等，茉莉酸甲酯对菊花抗蚜性的影响)。

与其他经济作物不同的是，贝母的经济价值并不依赖于其产量，而主要依赖于药效品质，所以贝母商品药材以小为贵，价值最高的是松贝，形态为怀中抱月，直径一般0.5-0.8厘米；其次为青贝，两瓣大小相同，相互抱合，直径一般为0.8-1.5厘米。但是现有用于促生相关激素(生长素、细胞分裂素、赤霉素)、提高产量的相关产品应用于贝母时，反而会导致贝母药效品质的降低，影响贝母的商业价值。而关于贝母提质的研究中发现，现有种植的三年生甘肃贝母生物碱含量为0.044％，经纳米铁处理后为0.052％，虽然提高了18.2％，但绝对含量仅勉强达到药典标准；四年生贝母空白对照生物碱含量为0.163％，经纳米铁处理为0.128％，反倒降低了21.5％(杨涛等，纳米铁和褪黑素对驯化栽培条件下甘肃贝母产量和品质的影响)。由此可见，纳米铁对不同年份贝母品质的影响并不稳定。

因此，依据中药材品质形成的“逆境效应”，实现提质效果，本发明提供了一种复合微生物菌剂，能够有效促进贝母內源茉莉酸积累、促进生物碱含量的提升，在保证产量不降低的前提下，具有显著的提质效果。

发明内容