[发明专利]结膜中伏立康唑药物的检测方法

说明书

本发明公开了一种结膜中伏立康唑药物的检测方法。该检测方法包含以下步骤：采用液相色谱‑质谱联用法，对含结膜组织的待测液进行分析检测，即可；所述检测方法采用液相色谱内标法；所述液相色谱‑质谱联用法中的液相色谱采用的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为0.01％～0.5％的甲酸水溶液，所述百分比为甲酸的体积和水的体积比，所述流动相B为0.01％～0.5％的甲酸与乙腈的混合液，所述百分比为甲酸的体积和乙腈的体积比。该检测方法灵敏度高，能够快速、简便地检测结膜中的伏立康唑药物，检测限低。

技术领域

本发明涉及药物分析领域，具体涉及结膜中伏立康唑药物的检测方法。

背景技术

结膜是覆盖在上、下眼睑内和眼球前面的一层粘膜。其由复层柱状上皮和少量结缔组织形成。结膜内含有丰富的血管和神经末梢，并有少量的粘液腺，能分泌粘液，滑润眼球，以减少睑结膜与角膜的摩擦。急性细菌性结膜炎和病毒性结膜炎都是因为细菌和病毒侵染了结膜而引起的，并且都有传染性。

其中，结膜炎是眼科的常见病，是结膜组织在外界和机体自身因素的作用而发生的炎性反应的统称。由于大部分结膜与外界直接接触，因此容易受到周围环境中感染性(如细菌、病毒、及衣原体等)和非感染性因素(外伤、化学物质及物理因素等)的剌激，而且结膜的血管和淋巴组织丰富，自身及外界的抗原容易使其致敏。它起病急骤、来势凶猛严重影响着人们的工作生活，如不及时治疗还会转成慢性结膜炎。虽然结膜炎本身对视力影响一般并不严重，但是当其炎症波及角膜或引起并发症时，可导致视力的损害。

目前临床上对于感染性急性结膜炎一般采用抗生素软膏或滴眼药物进行治疗，症状通常会在用药后的1周到6周内消除，但治疗过程中结膜炎的复发率较高，且滴眼液使用时会导致泪液的大量挥发易引发干眼症，严重影响着患者的工作和生活。临床上对于季节过敏性结膜炎的治疗通常采用滴眼液滴眼同时服用抗过敏药物来治疗，取得了不错的临床近期治疗效果。但这些药物大都具有潜在的肝脏毒性，且作用靶点单一，长期服用会影响患者的健康状况。

伏立康唑是新型第二代三唑类抗菌药，为氟康唑的衍生物；由于在氟康唑的丙基上增加1个甲基，故增加了对CYP酶的亲和力，同时嘧啶环及5位上的氟也增强了抗真菌的活性；因而该药物比其它三唑类抗菌谱更广、抗菌作用更强且耐受性较好，可作用于严重的真菌感染。由于伏立康唑作为抗菌药口服易导致不良反应，对于治疗眼疾，该药物主要是通过滴眼给药。但是，由于存在个体差异和治疗窗较窄，该药物可能导致一些不良反应，如视觉障碍、光敏性、神经毒性和肝功能障碍等。因此，通过建立伏立康唑的监测手段，应用于伏立康唑药代动力学以及毒代动力学的研究，可有效提高药物抗真菌治疗的有效性和安全性。

在药物研发过程中，候选化合物的体内药代动力学分析是非常关键的步骤。该分析不仅可以掌握其药效药理，还可以得到和毒性评价有关的信息。毒代动力学及药代动力学研究主要是通过测定血药浓度从而分析代谢过程。药物在组织中的浓度与药理效应直接相关，而药理效应又取决于靶器官的浓度，所以药物的组织分布与药理效应的产生更加密切。

通常使用放射性自显影技术(Autoradiography:ARG)和荧光色素标记细胞的方法进行分析。但是，ARG为生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术，不适合分析小分子物质，且使用ARG的方法成本高。而荧光色素标记细胞的方法，一方面无法区别原药和代谢物，另一方面标记物质的行为可能与未标记物存在差异。质谱成像法虽能够在无标记的情况下对各种物质的分布进行分析，还能够使用同一切片同时分析原药及其代谢物，但是该分析方法对于准确定量分析体内药物分布还有待完善。