[发明专利]一种裂蹄木层孔菌的miRNA及其应用

说明书

本发明属于生物技术和医学领域，涉及一种来自裂蹄木层孔菌的miR‑CM2～CM5的分离和鉴定，尤其涉及miR‑CM2～CM5的应用。所述miR‑CM2～CM5具有SEQ ID NO.1‑4所示的核苷酸序列，有良好的抗炎活性。将miR‑CM2～CM5在皮肤细胞或者组织中应用，可以抵抗脂多糖(LPS)及紫外线辐照诱导的炎症反应，降低炎症因子的表达。本发明还提供含有miR‑CM2，或miR‑CM3，或miR‑CM4，或miR‑CM5的皮肤外用剂，且证实其具有抗炎功效。为抗炎症护肤品的开发提供新的研究方向和研发基础。

技术领域：

本发明属于生物技术和医学领域，涉及一种来自裂蹄木层孔菌的miRNA，分别为miR-CM2、miR-CM3、miR-CM4、miR-CM5的分离和鉴定，以及应用。

背景技术：

皮肤是人体的第一道防线，最易受到外界环境的影响而导致皮肤受损、炎症或者老化。当出现外界刺激时，例如空气污染物等刺激源的接触、紫外线、物理损伤等，皮肤的免疫系统会启动信号，释放出各种各样的炎症因子，引起血流加快、血管的通透性增加，导致皮肤出现炎症反应，症状可能包括发红、发热、瘙痒、敏感和肿胀等。紫外线对皮肤最明显的急性作用之一是诱导炎症。UVB在皮肤中诱导细胞因子、血管活性和神经活性介质的级联反应，共同导致炎症反应并导致“晒伤”。由于经常接触不同的刺激物和过敏原，许多人都患有皮肤炎症，如果不及时治疗，可能会导致严重的健康问题。现代社会，随着人们对护肤重要性不断了解，对护肤知识不断增加，护肤已成为一种日常，且抗炎修复产品已经逐渐作为人们日常使用的化妆品之一。因此，探究和开发抗炎症的护肤品的原料和机制有着较大的现实意义。

脂多糖(LPS)主要由脂质和多糖组成，是革兰氏阴性菌细胞壁外壁的一种成分，是一种常见的内毒素。它可以通过细胞信号转导系统激活单核巨噬细胞、内皮细胞和上皮细胞等，合成和释放多种细胞因子和炎症介质，进而引起一系列炎症反应，导致炎症的出现。利用LPS诱导细胞炎症是细胞炎症造模的方法之一。此外，紫外线照射后，表皮细胞层数以及表皮厚度都会增加，形成更多的死皮，从而加重毛囊的堵塞程度，使得痘痘的炎症恶化。UV辐照可以模拟日晒刺激，构建炎症或者衰老模型。

裂蹄木层孔菌是一种典型的药用真菌，含有多糖，多酚，黄酮等化合物。越来越多的研究表明，裂蹄木层孔菌在抗肿瘤，保肝，减轻炎症反应，控制血糖等方面发挥着显著的调控作用。例如，从它身上分离的多糖可以抑制细胞中各种炎症因子的表达。此外，其水溶性提取物在特应性皮炎中发挥免疫调节作用。裂蹄木层孔菌提取物被列入已使用化妆品原料目录(2021年版)。目前，裂蹄木层孔菌提取物现已经被用于各种护肤品和化妆品的配方中。

microRNA(miRNA)是一类长度约为19-25nt的内源性非编码RNA。miRNA参与基因转录后调控，能够调节细胞和机体的生长，发育，并与人类的疾病相关。越来越多的研究表明，外源性的植物miRNAs可以调节哺乳动物靶基因的表达，实现跨界调控。例如，张辰宇发现金银花中的miR2911可以被小鼠吸收，通过靶向甲流病毒而抑制病毒复制。本申请发现裂蹄木层孔菌中的miRNA能够对人源的皮肤细胞进行跨界调节，发挥抵抗炎症的活性。这在抗炎护肤品的研发中有巨大的潜在应用价值。

发明内容：

本发明的目的是提供一种裂蹄木层孔菌的miRNA，分别为miR-CM2、miR-CM3、miR-CM4、miR-CM5及其应用，其中miR-CM2、miR-CM3、miR-CM4、miR-CM5均可减少炎症模型中炎症因子的表达，在抗炎护肤品的开发和应用中有潜在的价值。

本发明提供的技术方案之一，是一种来自裂蹄木层孔菌的miRNA，分别为miR-CM2、miR-CM3、miR-CM4或miR-CM5；

所述miR-CM2，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；

所述miR-CM3，具有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；

所述miR-CM4，具有SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；