[发明专利]一种β银环蛇毒检测用生物材料、一种非诊断目的检测β银环蛇毒的方法

说明书

本发明提供了一种β银环蛇毒检测用生物材料、一种非诊断目的检测β银环蛇毒的方法，属于磁吸附生物传感技术领域。本发明以AuNPs@ZnFe₂O₄@COF为磁性纳米复合材料，具有良好的吸附性，与β银环蛇毒的第一抗体结合，所得生物材料能够特异性识别并吸附捕获β银环蛇毒抗原，避免相似毒素成分的干扰，提高β银环蛇毒检测结果的灵敏性和准确度。本发明利用CuO₂‑Apt酶材料特异性识别β银环蛇毒并催化CuO₂的显色底物显色，随着β银环蛇毒的浓度增加，紫外分析检测到的吸光度增强，且在0.0001～100ng/mL的β银环蛇毒浓度范围内具有良好的线性关系，最低检测下限为0.1fg/mL。

技术领域

本发明涉及磁吸附生物传感技术领域，特别涉及一种β银环蛇毒检测用生物材料、一种非诊断目的检测β银环蛇毒的方法。

背景技术

银环蛇是陆地上第四大毒蛇，也是我国境内毒性最强的蛇，一条成年银环蛇的1毫克毒素可以致十几人死亡。银环蛇毒液中所含毒素，主要成分为蛋白质和多肽，以神经毒素为主，包括α-银环蛇毒素(α-BGT)、β-银环蛇毒素(β-BGT)、κ-银环蛇毒素(κ-BGT)、γ-银环蛇毒素(γ-BGT)和磷脂酶A等酶类等。被银环蛇咬时不会感到疼痛反而嗜睡，轻微中毒时身体局部产生麻痹现象，若是毒素作用于神经肌肉交接位置，则会阻绝神经传导路线，致使横纹肌无法正常收缩，导致呼吸麻痹，作用时间约40分钟至2小时，或长达24小时。在抗蛇毒血清应用以前，银环蛇咬伤死亡率极高。

目前传统的检测蛇毒的方法有ELISA法(酶联免疫吸附测定法)，此法将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。此方法可以直接使用抗体捕获β银环蛇毒抗原，并通过携带探针的抗体进行显色测定。然而，现有ELISA法检测β银环蛇毒时，易受相似毒素成分(如α-银环蛇毒，眼睛王蛇毒，金环蛇毒，蝮蛇毒)的干扰，影响测试结果的准确性。

发明内容

有鉴于此，本发明目的在于提供一种β银环蛇毒检测用生物材料、一种非诊断目的检测β银环蛇毒的方法。本发明提供的β银环蛇毒检测用生物材料能够特异性吸附β银环蛇毒，提高β银环蛇毒检测结果的灵敏性和准确度。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一种β银环蛇毒检测用生物材料，包括β银环蛇毒的第一抗体和与所述β银环蛇毒的第一抗体结合的AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料，所述AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料包括ZnFe₂O₄@COF和负载于所述ZnFe₂O₄@COF表面的金纳米粒子，所述ZnFe₂O₄@COF包括COF基体和负载于所述COF基体表面和内部的ZnFe₂O₄。

优选的，所述AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料中，金纳米粒子与ZnFe₂O₄@COF的质量比为(2.5～4.5):(7～9)；

所述ZnFe₂O₄@COF中，ZnFe₂O₄与COF基体的质量比为12～20:1。

优选的，所述AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料的制备方法，包括以下步骤：

将1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、对苯二甲醛、ZnFe₂O₄与有机酸催化剂混合，进行反应，得到ZnFe₂O₄@COF；