[发明专利]一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其应用在审
申请号: | 202111575916.6 | 申请日: | 2021-12-21 |
公开(公告)号: | CN114181865A | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 李鹏;叶雨婷;陈鹏泽;马天浩;曹宇 | 申请(专利权)人: | 海南师范大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/07 |
代理公司: | 深圳市创富知识产权代理有限公司 44367 | 代理人: | 何秉轩 |
地址: | 570000 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 茄雷尔氏菌有 高效 拮抗 作用 芽孢 及其 应用 | ||
1.一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌,其特征在于,该芽孢菌平板拮抗的方法包括以下步骤:
S1、将融化后的TTC培养基降至一定温度后将一定量茄雷尔氏菌与培养基一起混合;
S2、在每一个平皿上均倒入25ml混合后的培养基;
S3、待平板彻底凝固后在平板上打孔;
S4、在每个孔中加入20μL的芽孢菌生防菌液,生防菌液的菌株编号为HNU24;
S5、将平板放置于28℃恒温培养箱进行培养;
S6、培养后设置进行3次重复测量,测定抑菌圈的直径;
S7、经过多次平板拮抗实验,观察HNU24对茄雷尔氏菌的拮抗效果;
S8、对HNU24使用16S rDNA通用引物进行基因测序。
2.根据权利要求1所述的一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌,其特征在于,所述S3中,打孔工作采用打孔器进行,所述打孔器的打孔直径为7mm。
3.根据权利要求1所述的一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌,其特征在于,所述S5中,恒温培养箱的培养时间为48h。
4.根据权利要求1所述的一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌,其特征在于,所述S8中,将测序结果置于NCBI数据库中进行序列比对,HNU24属于Bacillus sp.。
5.一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌的应用,选用权利要求1-4所述的一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌,其特征在于,以番茄为寄主植物,检测菌株编号为HNU24的芽孢菌对茄雷尔氏菌的防治效果,在接种茄雷尔氏菌前,将番茄幼苗从土中轻轻取出后,在HNU24的菌悬液中浸泡5分钟后,再将其置于具强致病力的茄雷尔氏菌菌悬液中浸泡5min,然后将幼苗再移栽回无菌土中,于28℃温室条件下每天观察并统计番茄青枯病的发病情况。
6.根据权利要求1所述的一种对茄雷尔氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌的应用,其特征在于,所述的番茄幼苗为出苗后30天的番茄苗。
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