[发明专利]一株具有潜在抗肿瘤作用的I型单纯疱疹病毒株及应用

说明书

本发明提供一株具有潜在抗肿瘤作用的I型单纯疱疹病毒株，为单纯疱疹病毒1型HSV‑1 YMM株。通过透射电子显微镜观察和基因测序分析，分离病毒为100‑125nm左右的球形包膜病毒，基因序列与HSV‑1完全匹配，确定分离出一株HSV‑1病毒。其中，HSV‑1 YMM病毒株诱导卵巢癌细胞SKOV3和ES2高表达IFN‑a、IFN‑β、CXCL9和CXCL10，且IFN‑α、CXCL9和CXCL10表达高于HSV‑1 F病毒，推测HSV‑1 YMM相对于HSV‑1 F有更强的诱导抗肿瘤免疫和免疫细胞招募的能力，具有抗肿瘤开发潜力新的HSV‑1病毒株，为下一步开发新型溶瘤病毒药物的研发奠定了基础。

技术领域

本发明涉及一株具有潜在抗肿瘤作用的I型单纯疱疹病毒株及应用，属于病毒微生物技术领域。

背景技术

单纯疱疹病毒I型(herpes simplex virus type 1，HSV-1)属于疱疹病毒科，α疱疹病毒亚科，单纯疱疹病毒属，是一种包膜线性双链DNA病毒，病毒基因组全长152kb。HSV-1是一种在世界各地普遍流行的病毒原体，有证据表明，全球约67％的人一生中都被HSV-1感染过。绝大数人被HSV-1感染后症状较轻，主要表现为口腔疱疹，部分是生殖器疱疹。

溶瘤病毒是一类能够在肿瘤中选择性复制，在正常细胞中不复制或者低复制的病毒的总称。2015年，首个工程化表达人粒细胞-巨细胞刺激因子的I型单纯疱疹病毒T-Vec被美国食品和药物管理局(FDA)批准上市。HSV-1作为溶瘤病毒备受关注，也成为抗肿瘤药物的开发热点。2021年第二个HSV-1改造的溶瘤病毒Teserpaturev用于治疗恶性胶质瘤在日本获批上市。因此分离一株完全自主知识产权的适合用于溶瘤病毒改造的HSV-1病毒株成为溶瘤病毒药物开发的前提条件。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一株具有潜在抗肿瘤作用的I型单纯疱疹病毒株及应用。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一株具有潜在抗肿瘤作用的I型单纯疱疹病毒株，所述I型单纯疱疹病毒株为单纯疱疹病毒1型HSV-1 YMM株，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:V202189，保藏地址为武汉大学，保藏时间为2021年11月30日。

所述单纯疱疹病毒1型HSV-1 YMM株US4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

所述单纯疱疹病毒1型HSV-1 YMM株US4基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：14所示。

所述的I型单纯疱疹病毒株在制备抗肿瘤药物中的应用。

所述的I型单纯疱疹病毒株在制备疫苗中的应用。

本发明有益效果：

本发明从患者口唇疱液样本中分离得到一株病毒，经基因测序、透射电镜形态分析，鉴定分离病毒为I型单纯疱疹病毒，命名为HSV-1 YMM。通过透射电子显微镜观察和基因测序分析，分离病毒为100-125nm左右的球形包膜病毒，基因序列与HSV-1完全匹配，确定分离出一株HSV-1病毒。

本发明分离的HSV-1病毒株，与HSV-1 F的对比研究表明，HSV-1 YMM与HSV-1 F相比，具有相同的细胞毒性、复制能力及更强的诱导免疫的能力。其中，HSV-1 YMM诱导SKOV3和ES2上调IFN-a、IFN-β、CXCL9和CXCL10的表达；HSV-1 YMM诱导SKOV3和ES2上调IFN-a、CXCL9和CXCL10倍数显著高于HSV-1 F。

本发明的HSV-1 YMM病毒株诱导卵巢癌细胞SKOV3和ES2高表达IFN-a、IFN-β、CXCL9和CXCL10，且IFN-α、CXCL9和CXCL10表达高于HSV-1 F病毒，推测HSV-1 YMM相对于HSV-1 F有更强的诱导抗肿瘤免疫和免疫细胞招募的能力。