[发明专利]一种核酸探针及其应用

说明书

本发明提供了一种核酸探针及其应用。所述核酸探针的5’端标记有荧光标记，3’端标记有ddNTP。

技术领域

本发明属于免疫检测领域，具体涉及一种两端标记的核酸探针。

背景技术

现有的胶体金检测大多数是一种免疫检测与诊断技术，基于核酸扩增的检测技术相对较少。而核酸胶体金检测技术会产生非特异性扩增及信号，这使得大多数核酸胶体金检测卡仅能实现单重扩增，实现双重乃至多重扩增对于设计要求大大提高，限制了核酸胶体金检测卡在多指标检测方向的应用。

发明内容

本发明之一提供了一种核酸探针，其5’端标记有抗原标记，其3’端标记有ddNTP。

在一个具体实施方式中，所述抗原为FAM、Dig、FITC和HEX中的一种。

在一个具体实施方式中，所述ddNTP为ddATP、ddGTP、ddCTP和ddTTP中的一种。

在一个具体实施方式中，所述核酸探针的序列如SEQ ID No.2和/或SEQ ID No.6所示。

本发明之二提供了根据本发明之一所述的核酸探针在免疫检测中的应用。

在一个具体实施方式中，所述免疫检测的对象为对象为对虾急性肝胰腺坏死病病原和/或对虾肝肠胞虫。

本发明的有益效果：

本发明在探针两端同时进行标记，一端进行抗原标记，另一端使用ddNTP进行封闭，从而实现减少非特异性扩增，提高检测特异性，降低引物，探针的设计难度，达到实现核酸胶体金检测卡多重检测的目的。

附图说明

图1显示了将扩增产物置入生物防污染检测卡的示意图。

图2显示了应用例1的检测结果，其中C₁代表羊抗兔抗体的划膜位置，用于质控；C₂代表地高辛抗体划膜位置；T代表FAM抗体划膜位置。

图3显示了应用例2的检测结果，其中C₁代表羊抗兔抗体的划膜位置，用于质控；C₂代表地高辛抗体划膜位置；T代表FAM抗体划膜位置。

图4显示了对比应用例1的检测结果，其中C₁代表羊抗兔抗体的划膜位置，用于质控；C₂代表地高辛抗体划膜位置；T代表FAM抗体划膜位置。

图5显示了对比应用例2的检测结果，其中C₁代表羊抗兔抗体的划膜位置，用于质控；C₂代表地高辛抗体划膜位置；T代表FAM抗体划膜位置。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明实施例仅为示例性的说明，该实施方式无论在任何情况下均不构成对本发明的限定。

生物防污染检测卡为江苏猎阵生物科技有限公司生产的封闭式防污染胶体金检测试纸条，试纸条中的金标垫上点有抗生物素抗体，从距离样品孔的近端到远端依次标记有FAM抗体，DIG抗体及羊抗兔抗体。

实施例1

用于检测对虾急性肝胰腺坏死病(EMS，Early Mortality syndrome)病原副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)pirB基因(如SEQ ID No.1所示)的探针的核酸序列如SEQ ID No.2所示。

于上海生工生物科技有限公司合成EMS病原核酸探针，合成探针定名为JAP，在5’端标记为地高辛(Dig)，在3’端标记ddCTP。