[发明专利]间充质干细胞凋亡微囊泡联合水凝胶在制备哺乳动物皮肤修复产品中的应用

说明书

本发明提供了间充质干细胞凋亡微囊泡联合水凝胶在制备哺乳动物皮肤修复产品中的应用，属于再生医学技术领域。在本发明中，间充质干细胞凋亡微囊泡能够促进新生组织的血管化、调节受体组织局部的免疫微环境从而加速皮肤伤口的上皮化来促进愈合。生物相容性良好的水凝胶不仅能够有效地保护间充质干细胞凋亡微囊泡的流失，还能够保证间充质干细胞凋亡微囊泡的生物学活性。本发明将间充质干细胞凋亡微囊泡和水凝胶联合应用，可以提高间充质干细胞凋亡微囊泡的利用效率和皮肤修复效果，更好地发挥其生物学功能，从而加速伤口的愈合，促进损伤皮肤的修复与再生。

技术领域

本发明属于再生医学技术领域，具体涉及间充质干细胞凋亡微囊泡联合水凝胶在制备哺乳动物皮肤修复产品中的应用。

背景技术

皮肤位于身体表面，直接同外界环境相接触，具有保护、排泄、调节体温和感受外界刺激等作用，是人体中最大的器官。皮肤保护体内各种组织和器官免受外界刺激，是人体非常重要的天然屏障。皮肤分为表皮层和真皮层。在正常情况下，表皮角质层细胞不断脱落，由基底细胞增殖补充，这是生理性再生。如皮肤受到损伤后愈合，则称修复性再生，其再生过程和修复时间，因受伤的面积和深度而有所不同。小面积的损伤，数天即能愈合，且不留瘢痕，而大面积的损伤，则会导致瘢痕，造成功能受限等。

皮肤的再生过程是：损伤面发生凝血，下面结缔组织内的成纤维细胞增殖，毛细血管增多，形成肉芽组织，接着产生胶原纤维和基质，形成新的结缔组织以修补伤口，同时，伤口处周围表皮的基底细胞，以及残存的毛囊和汗腺上皮细胞不断分裂，覆盖损伤表面，最后形成复层上皮，伤口即完全愈合。如皮肤损伤面积较大较深时，表皮修复比较困难，需采取植皮的方法，帮助创伤修复，创伤修复后常留下瘢痕。目前，探索能够促进损伤皮肤组织再生的手段具有重大的科学及医学意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供间充质干细胞凋亡微囊泡联合水凝胶在制备哺乳动物皮肤修复产品中的应用，间充质干细胞凋亡微囊泡联合水凝胶能够有效促进损伤皮肤组织再生。

本发明提供了间充质干细胞凋亡微囊泡联合水凝胶在制备哺乳动物皮肤修复产品中的应用。

优选的，所述水凝胶包括温敏型水凝胶。

优选的，所述间充质干细胞包括骨髓间充质干细胞。

优选的，所述凋亡微囊泡的制备方法包括以下步骤：

(1)对骨髓间充质干细胞进行传代培养后，加入星孢菌素溶液进行凋亡诱导培养，收集含有凋亡细胞的上清液；

(2)对步骤(1)中所述上清液进行差速离心，收集差速离心后的沉淀；所述差速离心包括：在800～1000g条件下对上清液进行第一离心，收集第一离心上清液；在15000～16000g条件下对所述第一离心上清液进行第二离心；

(3)将步骤(2)中所述差速离心得到的沉淀重悬后，进行第三离心，收集第三离心的沉淀，得到凋亡微囊泡。

优选的，所述骨髓间充质干细胞为第2～4代骨髓间充质干细胞。

优选的，步骤(3)中所述第三离心的离心力为15000～16000g；所述第三离心的时间为25～30min。

优选的，所述间充质干细胞凋亡微囊泡和水凝胶的质量比为1：(1～3)。

优选的，所述产品包括药品；所述药品的剂型包括注射剂。

优选的，所述哺乳动物包括小鼠、大鼠、兔、狗、羊、牛、猪或者人。

本发明提供了一种促进哺乳动物皮肤损伤修复的产品，包括间充质干细胞凋亡微囊泡和水凝胶；所述间充质干细胞凋亡微囊泡和水凝胶的质量比为 1：(1～3)。