[发明专利]一种基于脂肪组织的中枢靶向递送siRNA的方法及应用

说明书

本发明公开了一种基于脂肪组织的中枢靶向递送siRNA的方法，对人或模型动物脂肪组织注射装载有siRNA的病毒载体，病毒为腺相关病毒、慢病毒或腺病毒。还公开一种基于脂肪组织的中枢靶向递送siRNA的应用，将上述方法，应用于治疗阿尔兹海默症。本发明通过利用宿主自身的器官分泌的外泌体作为载体，克服siRNA靶向递送中的血脑屏障的制约，有效的将靶向BACE1的siRNA运送至神经元中，降低了Aβ沉积改善阿尔兹海默症的认知损伤，解决了传统siRNA递送载体具有的免疫原性和毒性问题；方法灵活可变，可实现不同siRNA的同时递送，不需经过复杂的体外外泌体预组装过程，极大降低成本及风险，便于规模化临床应用。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种基于脂肪组织的中枢靶向递送siRNA的方法及应用。

背景技术

老龄化进程进一步加重，伴随而来的是一个不可忽视的问题：中枢神经系统相关疾病，如老年痴呆(阿尔兹海默病)、帕金森、脑肿瘤等发病率的升高。老年痴呆症是继心血管病、脑血管病和癌症之后，成了老人健康的“第四大杀手”，且目前尚无有效治疗或逆转疾病进展的药物。中枢神经系统由于血脑屏障的存在，目前大多数的药物无法穿过，这使得对中枢神经系统疾病的治疗成为一大挑战。因此，研发高效、安全的中枢药物递送方法成为治疗神经系统疾病的关键。

小干扰RNA(siRNA)特异性抑制致病靶向基因的表达，起到治疗疾病的作用。外泌体可以包裹小RNA(包括miRNA和siRNA)并分泌至循环系统，而分泌出来的外泌体可靶向受体细胞，将siRNA递送到受体细胞并发挥生物学功能。由于外泌体是细胞自身分泌的囊泡，与其他载体相比，其具有低免疫原性和低毒性的特点，是一种良好的小RNA天然载体。而为了让外泌体更好的靶向中枢，现有技术通过脑靶向肽(狂犬病毒糖蛋白RVG) 对外泌体进行修饰，但是这可能增加免疫反应。此外，传统的基于外泌体 siRNA递送的策略中，siRNA需要在体外培养环境与外泌体进行预组装，该方法成本较高，过程复杂且风险不易控制，得到的外泌体难以达到临床需求，这很大程度上限制了其大规模的应用。

发明内容

有鉴于此，本发明期望提供一种基于脂肪组织靶向神经元递送siRNA 药物的方法及应用，能够有效的将靶向BACE1的siRNA运送至神经元中，降低了Aβ沉积改善阿尔兹海默症的认知损伤，提供了低免疫原性和低毒性的靶向神经元的给药方式；而且，本发明方法不需经过复杂的体外外泌体预组装过程，极大降低成本及风险，便于规模化临床应用。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种基于脂肪组织的中枢靶向递送siRNA的方法，对人或模型动物脂肪组织注射装载有siRNA的病毒载体，所述病毒为腺相关病毒、慢病毒或腺病毒。

这里，可装载不同siRNA，实现不同siRNA的同时递送，操作简便，不需经过复杂的体外外泌体预组装过程，极大降低成本及风险，便于规模化临床应用。

进一步地，所述腺病毒为rAAV-siRNA腺相关病毒。

进一步地，所述病毒为rAAV-siBACE1腺相关病毒。

进一步地，所述病毒为rAAV-palm-mCherry腺相关病毒。

进一步地，所述模型动物为小鼠。

这里，所述小鼠可以为AAP/PS1小鼠或C57小鼠，AAP/PS1小鼠为AD 老年痴呆小鼠。

进一步地，所述脂肪组织为内脏脂肪组织、皮下脂肪组织、臀股脂肪组织、肌间脂肪组织、心外脂肪组织、性腺脂肪组织或棕色脂肪组织。

这里，向上述任意一种脂肪组织注射装载siRNA的病毒载体，均有中枢靶向递送siRNA的功能。

本发明还另外提供了一种基于脂肪组织的中枢靶向递送siRNA的应用，将上述一种基于脂肪组织的中枢靶向递送siRNA的方法，应用于治疗阿尔兹海默症。