[发明专利]一种用于减盐酱油中耐盐乳酸菌的检测方法

说明书

本发明涉及一种用于减盐酱油中耐盐乳酸菌的检测方法，包括如下步骤：葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、氯化钠、产气促进因子、醋酸钠、柠檬酸二铵、吐温80、硫酸镁、硫酸锰和水混合，并加入pH缓冲剂调整pH值在5.0‑6.5，然后分装至10mL的试管中，加杜氏小导管，升温灭菌，得到培养基；待测样品采用无菌7.5％氯化钠盐水进行梯度稀释，接种1mL至上述培养基中后，然后制造厌氧环境，完成接种；在36±1℃下培养，观察，根据杜氏小导管中的产气量和试管中产气特征来确定是否含有耐盐乳杆菌。所述检测方法可以方便的检测减盐酱油中是否存在耐盐乳酸菌，酱油样品是否存在涨瓶渗漏风险，能够控制和保证减盐酱油产品质量。

技术领域

本发明涉及一种用于减盐酱油中耐盐乳酸菌的检测方法，属于乳酸菌检测技术领域。

背景技术

酱油是人们日常生活中常用的调味品，健康减盐是食品工业发展的必经之路，减盐酱油的市场也逐渐壮大。目前减盐酱油的盐分含量通常在12％左右，有些减盐酱油的盐含量甚至能够低到10％以下，由此也出现了一批在减盐酱油特定环境中存活繁殖的乳酸菌，例如典型代表菌株lactobacillus halophilus和loigolactobacillus rennini，该类微生物能够引起减盐酱油的酸败、产气，但是不会引起普通酱油(通常盐含量≥15％)的异常，目前针对该类微生物没有特别的检测方法。

CN101348826中提到了酱油等调味品中产气菌的检测方法，但是主要分析的微生物是一类芽孢菌，本发明所述的产气菌指能够引起减盐酱油(盐含量≤12％)胀气、渗漏的一类耐盐乳杆菌。CN108841914A中提到了一种用于调味品的检测方法及用于培养产气乳杆菌的培养基，但培养基中没有一定盐环境，且整体培养时间需要120±2h，培养时间较长。

现有的行业技术一般是以MRS培养基做为乳酸菌的检测方法，本发明研究人员在减盐酱油中发现了能够引起减盐酱油产气酸败的特殊乳酸菌，例如lactobacillushalophilus和loigolactobacillus rennini，该类乳酸菌在普通MRS平板上难以生长，在调味品的其他领域也未见对该类微生物的检测进行研究报道，因此，本发明针对该类微生物进行了检测方法的开发，为减盐酱油产品中该类微生物的检测和防治提供了基础。

发明内容

本发明针对现有技术存在的不足，提供一种用于减盐酱油中耐盐乳酸菌的检测方法，所述检测方法可以实现减盐酱油中耐盐乳酸菌lactobacillus halophilus和loigolactobacillus rennini的检测，可以方便的检测减盐酱油中是否存在耐盐乳酸菌，减盐酱油样品是否存在涨瓶渗漏风险，能够控制和保证减盐酱油产品质量。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种用于减盐酱油中耐盐乳酸菌的检测方法，所述的检测方法包括如下步骤：

(1)配制培养基：葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、氯化钠、产气促进因子、醋酸钠、吐温、硫酸镁、硫酸锰和水混合，并加入pH缓冲剂调整pH值在5.0-6.5，然后分装至10mL的试管中，加杜氏小导管，升温灭菌，得到培养基；

(2)待测样品采用无菌7.5％氯化钠盐水进行梯度稀释，接种1mL至上述培养基中后，然后制造厌氧环境，完成接种；

(3)将接种后的培养基放置在36±1℃下培养，观察，根据杜氏小导管中的产气量和试管中产气特征来确定是否含有耐盐乳杆菌。

优选的，按照重量份数计，所述葡萄糖10-30份，蛋白胨5-15份，牛肉膏5-15份，酵母膏1-10份，氯化钠75-120份，产气促进因子2-10份，醋酸钠1-10份，吐温800.1-5份、硫酸镁0.1-5份、硫酸锰0.1-5份、pH缓冲剂2-10份，水800-1200份。

优选的，所述的产气促进因子为谷氨酸、精氨酸、亮氨酸和赖氨酸中的一种或几种组合。

优选的，所述的pH缓冲剂为磷酸氢二钾和柠檬酸二铵中的一种或两种组合。