[发明专利]一种槟榔碱背景下的口腔癌动物模型及造模方法

说明书

本发明提供了一种槟榔碱背景下的口腔癌动物模型的造模方法，包括以下内容：将DMBA溶液涂抹在地鼠颊部粘膜，再在涂抹部位注射槟榔碱溶液；每周操作步骤1三次以上。相比传统DMBA涂抹法制造口腔癌动物模型的造模时间至少需要15周且成功率低的问题，本申请缩短至11周即可，且成功率达100％，极大提高了该方法的造模成功率。该方法简便易行，可操作性高。

技术领域

本发明涉及口腔癌造模技术领域，具体设计一种槟榔碱背景下的口腔癌动物模型及造模方法。

背景技术

口腔鳞状细胞癌(OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一，其存在预后较差、转移较快、复发率较高且五年存活率较低的问题。因此，发明一种快速且可靠的动物模型对人类口腔癌的预防、发生及预后的研究十分重要。传统的口腔癌造模技术分为：1.自发性口腔癌动物模型；该方法动物肿瘤的发生、发展过程与人类肿瘤的过程很相似，但该模型存在饲养量大、周期长、耗资大的缺点，目前并未推广使用；2.诱发性动物模型，即通过二甲基苯并蒽(9，10-dimethyl-1，2-benzanthracene，DMBA)涂抹动物颊部粘膜或使动物自然饮用4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide，4NQO)来进行诱惑，但其诱导周期较长，通常在15周以上且诱导成功率不高；3.移植性动物模型，即通过在动物皮下注射OSCC肿瘤细胞的方式来获得口腔癌动物模型，该方法每次接种耗时较长、需无菌条件、对实验动物创伤较大、术后感染率较高。

发明内容

本发明的目的是针对以往的口腔癌动物模型，提供一种快速且成功率高的动物模型的造模方法，该方法简便易行，成瘤率极且较以往相比，大大缩短了模型的造模时间，成瘤率极高，为人类口腔癌的防治提供了一个简便快捷的研究平台。

本发明的具体技术方案是：

一种槟榔碱背景下的口腔癌动物模型的造模方法，其特征在于，包括以下内容：

1)将DMBA溶液涂抹在地鼠颊部粘膜，再在涂抹部位注射槟榔碱溶液；

2)每周操作步骤1三次以上。

一种实施方式，每周操作步骤1三次，每次涂抹DMBA溶液4-6s，注射槟榔碱溶液0.2-0.4ml。

一种实施方式，所述DMBA溶液的制备方法为将DMBA(二甲基苯并蒽)溶入石蜡油中，配制质量浓度为0.3-0.8％。

一种实施方式，所述DMBA溶液质量浓度为0.5％。

一种实施方式，所述槟榔碱溶液的制备方法为将槟榔碱粉剂溶入PBS缓冲液中，浓度为0.5-1.5mg/ml。

一种实施方式，所述槟榔碱溶液浓度为1mg/ml。

一种实施方式，所述地鼠选自叙利亚黄金地鼠.

一种实施方式，还包括模型验证。

一种实施方式，所述模型验证包括：取颊部肿瘤组织，用中性甲醛溶液固定，常规组织处理，石蜡包埋，4μm切片，苏木精伊红染色，进行组织病理学观察。

本发明还提供了一种槟榔碱背景下的口腔癌动物模型，采用上述槟榔碱背景下的口腔癌动物模型的造模方法得到。

本发明的有益效果：