[发明专利]一种用于护肤品制剂的干细胞破碎液的制备方法及应用

权利要求书

1.一种用于护肤品制剂的干细胞破碎液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)选取哺乳动物的脂肪，全程采用生理盐水清洗，通过离心除去水分和油分，在得到的脂肪滤渣中加入Ⅰ型胶原酶进行消化，离心、清洗，得到含有脂肪干细胞的SVF细胞团；

2)将SVF细胞团P₀代进行细胞重悬，之后播种于培养瓶中进行扩增培养，得到P₁代，之后进行换代培养，并将每次换下来的培养基收集起来，最后除去培养瓶，得到干细胞，将收集到的培养基置于低温冻干机中进行浓缩，浓缩至10～15倍，得到浓缩培养基；

3)将步骤2)得到的干细胞放置于生理盐水中形成浓度为(1～5)×10⁸/mL的混悬液，置于低温环境中，进行超声波破碎，作用时间9～11s间隔4～5s，总时长8～12min，频率280～330Hz，即获得细胞破碎液，经滤菌器进行过滤，再通过核酸酶去除具有抗原性的核酸成分；

将获得的细胞破碎液以及浓缩培养基混合，即得到干细胞破碎液。

2.由权利要求1所述的干细胞破碎液的制备方法，其特征在于，步骤1)所述离心的条件为转速为800～1000r/min，时间为8～12min。

3.由权利要求1所述的干细胞破碎液的制备方法，其特征在于，步骤2)所述细胞重悬为采用10％胎牛血清或者人血清，之后接种在T75的培养瓶中。

4.由权利要求1所述的干细胞破碎液的制备方法，其特征在于，步骤3)中在得到干细胞破碎液中加入0.02～0.03mol/L EDTA和0.1～0.5％传明酸。

5.一种权利要求1～5任一项所述干细胞破碎液应用于制备护肤品，其特征在于，包括护肤水、护肤乳、精华液以及保湿霜。

6.由权利要求6所述的干细胞破碎液应用于制备护肤品，其特征在于，所述护肤水的组成以及质量占比为：权利要求1所述干细胞破碎液1～5％、卵磷脂1～2％、蓖麻油0.1～0.3％、角鲨烷0.1～0.3％、维生素E 0.05～0.1％、硫酸软骨素钠0.01％、山梨醇3～5％、PEG20000 3～5％、维生素B 0.01～0.05％、维生素C 0.01～0.05％、调香精油适量，去离子水加满至100。

7.由权利要求6所述的干细胞破碎液应用于制备护肤品，其特征在于，所述护肤乳为抗过敏乳，其组成以及质量占比为：权利要求1所述干细胞破碎液3～5％、柠檬酸钠0.5～1％、丁二醇10～15％、氢化卵磷脂10％、胆固醇3～5％、神经酰胺0.5～1％、泛醌3～5％、厚朴酚3～5％、调香精油适量，去离子水加满至100。

8.由权利要求6所述的干细胞破碎液应用于制备护肤品，其特征在于，所述精华液的组成以及质量占比为：权利要求1所述干细胞破碎液5～10％、甘油1～3％、1,2-戊二醇2～4％、1,2-乙二醇0.5～1％、EDTA-Na₂0.03～0.05％、丁二醇8～10％、卡波姆0.3～0.5％、精氨酸0.3～0.5％、玫瑰花水20％、海藻糖1～3％、甘油0.3～0.5％、甘草酸二钾0.03～0.05％、乳酸杆菌1～2％、莲胚芽提取物1～2％、去离子水加满至100。

9.由权利要求6所述的干细胞破碎液应用于制备护肤品，其特征在于，所述保湿霜的组成以及质量占比为：权利要求1所述干细胞破碎液5～20％、蜂蜡10～15％、卵磷脂1～2％、羊毛脂1～2％、C16醇3～5％、胚芽油10～12％、植物抗氧化剂0.3～0.5％、硼砂1～2％、甘油3～5％，调香精油适量，去离子水加满至100。