[发明专利]一种ε-聚赖氨酸微球载体及在少量精子冷冻保存中的应用

权利要求书

1.一种ε-聚赖氨酸微球载体，其特征在于，所述ε-聚赖氨酸微球载体由海藻酸钠和ε-聚赖氨酸制备而成，载体为中空微球，直径为50～180μm，外壳为海藻酸钠和ε-聚赖氨酸通过静电络合反应形成的聚电解质膜，内核为海藻酸钠溶液。

2.根据权利要求1所述的ε-聚赖氨酸微球载体，其特征在于，所述海藻酸钠分子量为70.0～200.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.0～3.0，溶液浓度为0.8～2.0wt％，溶液粘度为50.0～150.0mPa·s。

3.根据权利要求1所述的ε-聚赖氨酸微球载体，其特征在于，所述ε-聚赖氨酸分子量为5.0～30.0kD，溶液浓度为0.01～0.5wt％。

4.如权利要求1所述的ε-聚赖氨酸微球载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)海藻酸钠加入到生理盐水中高速搅拌使其完全溶解；

(2)海藻酸钠溶液以静电液滴法滴入浓度为0.1M氯化钙溶液中钙化30min，形成海藻酸钙凝胶珠；

(3)海藻酸钙凝胶珠加入到ε-聚赖氨酸溶液中，其中海藻酸钙凝胶珠与ε-聚赖氨酸溶液体积比为1:10，万向摇床震荡使海藻酸钙凝胶与ε-聚赖氨酸进行交联反应，10min后结束交联反应，去离子水清洗去除ε-聚赖氨酸溶液；

(4)所述步骤(3)中产物加入到55.0mM的柠檬酸钠溶液中液化5min，液化微球内核形成中空结构，生理盐水清洗3次，即得中空的ε-聚赖氨酸微球载体。

5.如权利要求1所述的ε-聚赖氨酸微球载体在少量精子冷冻保存中的应用。

6.根据权利要求5所述的ε-聚赖氨酸微球载体在少量精子冷冻保存中的应用，其特征在于，保存精子为睾丸穿刺精子、附睾穿刺精子及严重少精和弱精症患者的精子，使用时精子保存在微球空腔内，每个载体装载精子数量为1～20个。

7.根据权利要求5所述的ε-聚赖氨酸微球载体在少量精子冷冻保存中的应用，其特征在于，微球载体保存在冻存管中，每个冻存管中保存微球载体数量为1～20个，冻存管保存在液氮中。

8.根据权利要求5所述的ε-聚赖氨酸微球载体在少量精子冷冻保存中的应用，其特征在于，微球载体保存在麦氏管中，每个麦氏管中保存微球载体数量为1～20个，麦氏管保存在液氮中。