[发明专利]用于血糖快速检测的纳米酶功能化的纸基传感器及其检测方法有效

专利信息
申请号: 202111606544.9 申请日: 2021-12-26
公开(公告)号: CN114486870B 公开(公告)日: 2023-05-26
发明(设计)人: 白丽娟;易小娟;袁拥华;鄢斌 申请(专利权)人: 重庆医科大学
主分类号: G01N21/78 分类号: G01N21/78
代理公司: 重庆立川知识产权代理事务所(普通合伙) 50285 代理人: 李启林
地址: 400016 重庆*** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 用于 血糖 快速 检测 纳米 功能 传感器 及其 方法
【权利要求书】:

1.一种用于血糖快速检测的纳米酶功能化的纸基传感器,其特征在于:所述纸基传感器是通过将氯高铁血红素修饰的乙炔黑纳米酶的水溶液滴在纸片上,烘干后在纸基表面滴加TMB的乙醇溶液,干燥后构建完成;所述氯高铁血红素修饰的乙炔黑纳米酶的制备方法为:氯高铁血红素用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解,加入用超纯水溶解的乙炔黑溶液,搅拌3-8min,然后置于超声清洗器超声分散40-60min,再在常温下搅拌15-20h,以10000-15000rpm/min的转速离心,所得沉淀即氯高铁血红素修饰的乙炔黑纳米酶。

2.如权利要求1所述的纸基传感器,其特征在于,所述用于血糖快速检测的纳米酶功能化的纸基传感器的构建方法为:用打孔器将Whatman CHR 1号滤纸裁剪成的圆形纸片,将乙炔黑纳米酶的水溶液滴到裁剪好的圆形纸片上,37℃烘干30-40min;向烘干后的纸基表面滴加TMB的乙醇溶液,常温下等待乙醇挥发至纸基呈干燥状,纸基传感器的构建完成。

3.如权利要求1所述的纸基传感器,其特征在于:所述TMB的乙醇溶液为35mM。

4.如权利要求1所述的纸基传感器,其特征在于,采用如下步骤制备:

(1)乙炔黑纳米酶的制备:

称取4mg氯高铁血红素加入4mL的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液;将4mg的乙炔黑溶于4mL超纯水在超声波清洗器中常温超声5min使其充分溶解,然后在常温搅拌的条件下全部缓慢加入氯高铁血红素的DMF溶液中,持续搅拌5min,再置于超声清洗器超声分散50min,再将超声处理过后的混合液在常温下搅拌16h,以12000rpm/min的转速离心清洗至上清液透明无色,以超纯水再分散,定容至4mL即得乙炔黑纳米酶的水溶液;

(2)纸基传感器的构建:用直径为6mm的打孔器将Whatman CHR 1号滤纸裁剪成直径为6mm的圆形纸片,将20μL乙炔黑纳米酶的水溶液滴到裁剪好的圆形纸片上,37℃烘干35min;向烘干后的纸基表面滴加TMB的乙醇溶液,常温下等待乙醇挥发至纸基呈干燥状,纸基传感器的构建完成;所述TMB的乙醇溶液为35mM,用量为5μL。

5.一种利用如权利要求1-4任一项所述纳米酶功能化的纸基传感器检测血糖的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)用葡萄糖的标准品配制不同浓度的标准溶液,分别与溶解有GOD的PBS溶液混合,在37℃烘箱中反应30min,制得多个标准混合液;

(2)将各个标准混合液滴加到所述纸基传感器表面,待反应18min后用智能手机对颜色信号进行RGB颜色值读取,建立葡萄糖浓度与颜色信号之间的线性关系;

(3)取pH=6的溶解有GOD的PBS溶液,与血清混合,在37℃条件下混合反应30min;然后混合溶液滴于所述的纸基传感器表面,等待反应18min后,用智能手机读取颜色信号的RGB值,对RGB值进信号处理过后代入步骤(2)中得到的线性关系曲线中,即可得到待测血清的血糖浓度。

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