[发明专利]一种含有抗菌肽的壳芯结构纳米纤维膜的制备方法

说明书

本发明公开了一种含有抗菌肽的壳芯结构纳米纤维膜的制备方法，包括以下步骤：取PLGA粉末溶于DMF溶液搅拌溶解，得到浓度为10wt％～18wt％的壳层PLGA/DMF溶液备用；取KSL‑W粉末与4mL～5mL的蒸馏水混合得到芯层KSL‑W水溶液备用；静电纺丝机分别吸取壳层PLGA/DMF溶液和芯层KSL‑W水溶液形成纳米纤维膜；收集厚度为0.1mm～0.3mm的纳米纤维膜，而后将纳米纤维膜折叠并放置入温度为40℃～70℃的烘箱中烘干，得到含有抗菌肽的壳芯结构纳米纤维膜。利用同轴静电纺丝技术，保证了纤维膜的屏障性能，又提高了力学性能，抗菌肽使纳米纤维膜具有抗菌性，解决了现有膜性材料易与外界交通发生细菌感染而影响预后的缺点；在病损区有效地释放抗菌药物，提高复层纤维膜组织亲和性，同时降低药物的初期突释现象。

技术领域

本发明属于根尖周炎修复材料技术领域，尤其是涉及一种含有抗菌肽的壳芯结构纳米纤维膜的制备方法。

背景技术

根尖周炎是一种由牙髓内微生物感染引起的根尖周组织炎症和骨破坏的口腔常见疾病，临床上常用根管治疗去除牙髓内的感染，促进病损区愈合。现代根管治疗技术已愈发成熟，但仍有一部分患牙经过治疗后牙槽骨的破坏未停止。

随着牙髓病治疗技术的不断发展，再生性技术(如引导再生骨/组织再生等)越来越多的应用于较大范围的根尖周骨缺损的治疗中。引导骨/组织再生技术是指将生物膜材料作为屏障，排除上皮细胞和结缔组织的干扰，使受损的组织得以修复和替代，恢复组织原有的结构和功能。但是，使用不可吸收的生物膜需二次手术取出；使用可吸收的生物膜(例如Geistlich膜)，该生物膜的质地软，易塌陷移位，代谢较慢等，导致现有的生物膜在临床应用中存在缺陷。另外，对于伴有牙周病的手术适应症患者，术后生物膜易与外界交通而发生细菌感染，影响手术预后。

抗菌肽具有广谱抗菌活性，通过在细菌的细胞膜积累并发生构象的变化进而破坏膜结构的完整性，导致细胞内容物外流，细菌细胞膜破裂，也可能同时存在一些胞内抗菌机制，如抑制核酸合成，干扰蛋白质和抑制细胞膜合成等。抗菌肽的抗菌过程迅速，在接触微生物数秒里就能发生，这是传统抗生物无法相比拟的。此外，抗菌肽多数都是带有正电荷的，而细菌的细胞膜富含磷脂酰甘油或丝氨酸磷脂之类的磷脂而使其带有负电荷，两者之间极易发生电荷作用，使抗菌肽产生杀灭细菌的生物学效应。但是天然抗菌肽的抗菌活性相对较低，且容易水解，用于体内时稳定性差。其中抗菌肽KSL-W是根据天然抗菌肽的特性合成的具有较强抑菌性能的新型抗菌肽，其既具备天然抗菌肽广谱性和高效性的特点，还具有分子量小、成本低、组织毒性小、不易导致口腔菌群失调和不易产生耐药性的优点。

因此，为了解决上述技术问题，需要研制制备出具有良好生物相容性、优良的力学性能、适当降解性、具有抗菌性能的生物膜材料。

发明内容

本发明的目的是提供一种结构简单、保持抗菌肽KSL-W活性、具有良好的抗菌性能、屏障作用和成骨活性的一种含有抗菌肽的壳芯结构纳米纤维膜的制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种含有抗菌肽的壳芯结构纳米纤维膜的制备方法，包括以下步骤：

(1)从-20℃的冰箱内取1.0g～1.8g的PLGA粉末放置至室温，将PLGA粉末溶于8.2g～9.0g的DMF溶液中，并用磁力搅拌器搅拌溶解10s～30s，磁力搅拌器的转速为1000rpm/s，而后静置24h脱泡，得到浓度为10wt％～18wt％的壳层PLGA/DMF溶液，将壳层PLGA/DMF溶液置于4℃的环境下储存备用；

(2)从-20℃的冰箱内取出10mg～15mg的KSL-W粉末并放置至室温，将KSL-W粉末与4mL～5mL的蒸馏水混合，得到浓度为3.75mg/mL～4.75mg/mL的芯层KSL-W水溶液，并置于4℃的环境下储存备用；