[发明专利]一种可用于高脂低蛋白饲料的硫酸基多糖饲料添加剂的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种可用于高脂低蛋白饲料的硫酸基多糖饲料添加剂的制备方法及其应用。本发明通过固态发酵预处理原材料，木聚糖酶、褐藻胶裂解酶、甘露聚糖酶和果胶酶复合酶解，可以在较高底物浓度下进行酶解，极大的提高了酶解速率，同时提高了产物得率，使用环保、高效的工艺手段生产分子量低、可溶性好的硫酸基多糖。硫酸基多糖可以提高卵形鲳鲹在高脂低蛋白饲喂条件下的存活率，生长率，降低并一定程度修复由高脂低蛋白饲料饲喂引起的卵形鲳鲹机体损伤。

技术领域

本发明涉及一种复合酶解制备硫酸基多糖的制备方法，具体是涉及一种木聚糖酶、褐藻胶裂解酶、甘露聚糖酶和果胶酶复合酶解麒麟菜，并制备一种可用于高脂低蛋白饲料的硫酸基多糖饲料添加剂的制备方法及应用。

背景技术

鱼类因消化道较短，消化酶活力低，对饲料蛋白质利用率低，排泄物中氨氮含量过高。排泄物积累同时也会导致水体氨氮含量过高，制约鱼类生长和引发鱼类疾病。为降低水体环境中的氮磷含量，预防鱼类爆发疾病，实际养殖过程中在保证饲料营养均衡的条件下，普遍采取减少饲料蛋白质水平和适量提高脂肪水平的策略，这种养殖策略可达到促进鱼体生长、保护养殖水域的目的。但当饲料脂肪水平过高时易致使鱼体脂肪蓄积过量，抗应激能力下降，肝胰脏等组织受到损伤，反而导致鱼体生长缓慢，饵料系数上升，严重时导致高脂血症和营养性脂肪肝的发生，高温季节还会出现大量死亡，给生产造成巨大损失。

硫酸多糖也被称为多糖的硫酸化衍生物，是硫酸根取代了多糖结构中单糖分子的部分羟基而形成的一类具有多种功能的物质，可以通过天然制备或硫酸化的结构修饰而得到。硫酸多糖广泛存在于海藻类植物中，具有多种生理活性，尤其在降血脂、降血压、抗氧化等方面效果明显，且无毒副作用。硫酸基多糖作为优秀的功能性多糖，可以作为优秀的饲料添加剂在鱼类养殖中发挥重要作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供一种复合酶解制备可用于高脂低蛋白饲料的硫酸基多糖饲料添加剂的制备方法及相关应用。

本发明解决其技术问题所采用的的技术方案是：一种复合酶解制备硫酸基多糖的制备方法，包括以下步骤：

步骤1：麒麟菜粉菌酶协同发酵：将麒麟菜粉投入均质机，加入麒麟菜粉质量10％的稻壳，随后按照料液比1:1.5加水，发酵用水预先溶解褐藻胶裂解酶，其中褐藻胶裂解酶酶活25000-30000U/g，酶添加量为250-300U/g麒麟菜底物，混合搅拌均匀，将发酵菌接种到物料中，30℃发酵48h。

其中，所述发酵菌株为里氏木霉。

步骤2：木聚糖酶酶解：物料按照料液比约1:10加入水，使用木聚糖酶进行酶解，酶活力30000-40000U/g，酶添加量为300-400U/g麒麟菜底物，酶解温度 45-60℃，作用时间3h；

步骤3：复合酶解：用盐酸调节步骤3酶解结束后酶解液pH至3.5，随即使用甘露聚糖酶和果胶酶进行酶解，其中甘露聚糖酶酶活力40000-50000U/g，酶添加量为300-350U/g麒麟菜底物，果胶酶酶活力25000-30000U/g，酶添加量为 200-250U/g麒麟菜底物，酶解温度45-60℃，作用时间2h；

步骤4：灭酶：酶解液升温至95℃保持15min进行灭酶；

步骤5：板框过滤：灭酶结束后，酶解液进行板框过滤，去除不溶性残渣；

步骤6：醇沉：按酶解液体积的10％向步骤3制备的酶解液中加入乙醇，使大分子糖类物质沉降，随后离心去除酶解残渣；

步骤7：步骤6酶解液使用滤膜过滤除杂除菌，其中滤膜孔径规格为 0.45-0.95μm。

步骤8：酶解液浓缩：离心除杂上清液悬蒸浓缩至固形物含量≥25％；

步骤9：喷雾干燥：进口温度170-190℃，出风温度90-110℃，流速 8-12mL/min，得到硫酸基多糖干粉。