[发明专利]一种吖啶酯标记抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种吖啶酯标记抗体，其特征在于，包括吖啶酯、多氨基黑木耳多糖AF1和抗体；所述多氨基黑木耳多糖AF1为接枝有多个氨基的黑木耳多糖AF1；所述吖啶酯连接在多氨基黑木耳多糖AF1的氨基上；所述抗体与多氨基黑木耳多糖AF1相连。

2.如权利要求1所述的吖啶酯标记抗体，其特征在于，所述吖啶酯为AE-NHS、DMAE-NHS、Me-DMAE-NHS、NSP-DMAE-NHS和NSP-SA-NHS中的一种或多种。

3.如权利要求1所述的吖啶酯标记抗体，其特征在于，所述多氨基黑木耳多糖AF1的制备方法包括以下步骤：

（1.1）将黑木耳多糖AF1水溶液的pH调节至5~6后，边搅拌边加入马来酸酐溶液，加完，继续在搅拌下进行酯化反应，而后分离出产物，获得多羧基黑木耳多糖AF1；

（1.2）将多羧基黑木耳多糖AF1、乙二胺与水混合溶解后，加入EDC，调节pH至5.0~6.0，进行脱水缩合，而后分离出产物，获得多氨基黑木耳多糖AF1。

4.如权利要求3所述的吖啶酯标记抗体，其特征在于，步骤（1.1）中，所述黑木耳多糖AF1水溶液的浓度为1~5wt%；所述马来酸酐溶液的浓度为20~30wt%；所述黑木耳多糖AF1水溶液与马来酸酐溶液的体积比为1:0.02~0.04。

5.如权利要求3或4所述的吖啶酯标记抗体，其特征在于，步骤（1.1）中，所述马来酸酐溶液用20~30min加完，所述酯化反应的时间为50~70min。

6.如权利要求3所述的吖啶酯标记抗体，其特征在于，步骤（1.2）中，所述多羧基黑木耳多糖AF1、乙二胺与水的质量体积比为1g:0.15~0.25g:80~100mL。

7.一种如权利要求1~6之一所述吖啶酯标记抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将多氨基黑木耳多糖AF1溶于水中，制成多氨基黑木耳多糖AF1溶液；将吖啶酯溶解到DMF中，制成吖啶酯溶液；将多氨基黑木耳多糖AF1溶液与吖啶酯溶液混合后，搅拌反应，获得多氨基黑木耳多糖AF1-吖啶酯复合物溶液；

（2）将抗体溶解到PBS缓冲液中，获得抗体溶液；将抗体溶液与多氨基黑木耳多糖AF1-吖啶酯复合物溶液混合后，加入EDC，调节pH至5.0~6.0，进行脱水缩合，而后分离出产物，获得吖啶酯标记抗体。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述多氨基黑木耳多糖AF1溶液的浓度为0.1~0.3wt%；所述吖啶酯溶液的浓度为0.6~1.0wt%；所述多氨基黑木耳多糖AF1溶液与吖啶酯溶液的体积比为25~35:1。

9.如权利要求1~6之一所述吖啶酯标记抗体在制备磁微粒-吖啶酯化学发光检测试剂中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述磁微粒-吖啶酯化学发光检测试剂包括所述吖啶酯标记抗体、生物素标记抗体和链霉亲和素磁微粒。