[发明专利]抗虫蛋白Cry 3Bb胶体金免疫层析速测试纸条及其使用方法

权利要求书

1.一种胶体金免疫层析速测试纸条，所述试纸条包括底板以及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，其特征在于，样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫顺次由底板一端向底板另一端设置，所述金标垫包被抗虫蛋白Cry 3Bb单克隆抗体-胶体金结合物。

2.根据权利要求1所述的胶体金免疫层析速测试纸条，其特征在于，所述样品垫与金标垫相邻端、金标垫与反应膜相邻端以及反应膜与吸水垫相邻端重叠，重叠部分宽度均为1-2mm，所述样品垫与金标垫相邻端为样品垫叠放在金标垫上，所述金标垫与反应膜相邻端为金标垫叠放在反应膜上，所述反应膜与吸水垫相邻端为吸水垫叠放在反应膜上。

3.根据权利要求1或2所述的胶体金免疫层析速测试纸条，其特征在于，抗虫蛋白Cry3Bb单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.23865的杂交瘤细胞株1D71G8分泌得到。

4.根据权利要求1或2所述的胶体金免疫层析速测试纸条，其特征在于，反应膜上设有包被抗虫蛋白Cry 3Bb单克隆抗体的检测线和包被羊抗鼠IgG的质控线。

5.根据权利要求4所述的胶体金免疫层析速测试纸条，其特征在于，反应膜上设有的包被抗虫蛋白Cry 3Bb单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.23866的杂交瘤细胞株2H11 1H1分泌得到。

6.根据权利要求4所述的胶体金免疫层析速测试纸条，其特征在于，检测线和质控线间隔0.5-1.0cm。

7.根据权利要求1或2所述的胶体金免疫层析速测试纸条，其特征在于，所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述样品垫由玻璃纤维膜或滤纸制成，所述吸水垫由滤纸制成。

8.根据权利要求1或2所述的胶体金免疫层析速测试纸条的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)待测样品前处理：若待测样品为液体物质时，则直接取40-60μL待测样品检测，若待测样品为非液体物质时，则需要将待测样品90-110mg磨碎，加入0.5-1.5mL样品处理液充分混匀，冰上静置25-35min后取上清40-60μL检测；

2)检测：将试纸条浸入待测样品内，室温下作用5-10min，然后观察结果；

3)检测结果分析：

阳性：质控线、检测线均呈现条带，说明待测样本中有Cry 3Bb蛋白存在；

阴性：检测线不出现条带，质控线呈现条带，说明待测样本中没有Cry 3Bb蛋白存在；

失效：如果检测线、质控线均不出现条带或仅有检测线出现条带，说明试纸条失效。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，其中，样品处理液的配方为：1M Tris,pH 7.5 500uL，1M NaCL 1.5mL，0.5M EDTA 20uL，50％甘油2mL，10％SDS 1mL，用双蒸水配成10mL，使用时添加1片蛋白酶抑制剂以及50uL的1mM苯甲基磺酰氟。