[发明专利]可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测方法和多重荧光定量PCR检测试剂盒有效
| 申请号： | 202111624035.9 | 申请日： | 2021-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN114214443B | 公开（公告）日： | 2023-05-16 |
| 发明（设计）人： | 葛宇;顾文佳;冷桃花;胡成国;吴新 | 申请（专利权）人： | 上海市质量监督检验技术研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/19;C12R1/01;C12R1/445;C12R1/42 |
| 代理公司： | 上海华工专利事务所(普通合伙) 31104 | 代理人： | 缪利明;赵孟琴 |
| 地址： | 200233 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 同时 检测 多种 微生物 多重 荧光 定量 pcr 方法 试剂盒 | ||
1.一种可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，包括：扩增大肠埃希氏菌O157成分的特异性引物对和检测大肠埃希氏菌O157成分的特异性探针；扩增沙门氏菌成分的特异性引物对和检测沙门氏菌成分的特异性探针；扩增金黄色葡萄球菌成分的特异性引物对和检测金黄色葡萄球菌成分的特异性探针；扩增单核细胞增生李斯特氏菌成分的特异性引物对和检测单核细胞增生李斯特氏菌成分的特异性探针；扩增诺如病毒GI成分的特异性引物对和检测诺如病毒GI成分的特异性探针；扩增诺如病毒GII成分的特异性引物对和检测诺如病毒GII成分的特异性探针；扩增轮状病毒成分的特异性引物对和检测轮状病毒成分的特异性探针；以及内参引物对和探针；
所述扩增大肠埃希氏菌O157成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示，检测大肠埃希氏菌O157成分的特异性探针的序列如SEQ ID NO.3所示；扩增沙门氏菌成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示，检测沙门氏菌成分的特异性探针的序列如SEQ ID NO.6所示；扩增金黄色葡萄球菌成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示，检测金黄色葡萄球菌成分的特异性探针的序列如SEQID NO.9所示；扩增单核细胞增生李斯特氏菌成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示，检测单核细胞增生李斯特氏菌成分的特异性探针的序列如SEQ IDNO.12所示；扩增诺如病毒GI成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示，检测诺如病毒GI成分的特异性探针的序列如SEQ ID NO.15所示；扩增诺如病毒GII成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.16和SEQ ID NO.17所示，检测诺如病毒GII成分的特异性探针的序列如SEQ ID NO.18所示；扩增轮状病毒成分的特异性引物对的序列如SEQID NO.19和SEQ ID NO.20所示，检测轮状病毒成分的特异性探针的序列如SEQ ID NO.21所示，扩增内参引物对的序列如SEQ ID NO.22和SEQ ID NO.23所示，检测内参探针的序列如SEQ ID NO.24所示。
2.如权利要求1所述的可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，还包括阳性对照，所述阳性对照包括载有大肠埃希氏菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、诺如病毒GI、诺如病毒GII和轮状病毒的特异基因序列片段的质粒。
3.权利要求1或2所述的可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测试剂盒在定性检测蔬菜中是否含有大肠埃希氏菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、诺如病毒GI、诺如病毒GII和轮状病毒中的应用。
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