[发明专利]一种测定泪液葡萄糖浓度的无酶传感器及检测方法

权利要求书

1.一种测定泪液葡萄糖浓度的无酶传感器检测方法，其特征在于：所述无酶传感器包含：工作电极，银氯化银参比电极，铂对电极，其中所述工作电极以金为基底直径为1um，表面覆盖复合纳米材料；所述的复合纳米材料结构：由表面活性剂和金纳米颗粒组成壳，铂镶嵌在金壳表面，制得Au@Pt介孔型纳米颗粒，将制得的Au@Pt介孔型纳米颗粒与亲水性聚氨酯混合滴加到金基底制成电极；

检测方法包括以下步骤：

(1)建立葡萄糖标准样品溶液浓度与瞬态响应峰频率的关系曲线：

配制不同浓度的葡萄糖标准样品溶液；将无酶传感器放入不同浓度的葡萄糖标准样品溶液中，外加电压使无酶传感器工作，通过外接接收信号装置接收测得的电流信号，记录一定时间内每个浓度下瞬态响应峰的频率；

至少重复三次上述步骤的测量过程，得到葡萄糖标准样品溶液浓度与无酶传感器催化氧化葡萄糖产生瞬态响应峰频率的关系曲线，该关系曲线用于通过测得的碰撞峰的频率来计算真实泪液中的葡萄糖浓度；

(2)在泪液中的葡萄糖浓度：

将无酶葡萄糖电极装配在隐形眼镜盒中，外接检测装置；将佩戴过待清洗的隐形眼镜片放进装有碱性清洗液的隐形眼镜片清洗室中，静置1min；打开检测装置，使得无酶传感器电极工作，葡萄糖分子在电极上被催化氧化产生瞬态响应峰，计算瞬态响应峰的频率，与标准曲线对比，得出溶液中葡萄糖的浓度，并通过稀释比例反推出眼泪中的葡萄糖浓度。

2.根据权利要求1所述的一种测定泪液葡萄糖浓度的无酶传感器检测方法，其特征在于，所述工作电极的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)制备Au@Pt介孔型纳米颗粒

①将Briji58加入到去离子水中，Briji58与去离子水的质量体积比为1-10:25，在磁力转子500-600rpm搅拌10-20min，待完全溶解即观察到溶液中没有固体颗粒，最终得到溶液a；

②以20mMK₂PtCl₆溶液和20mMH₂AuCl₄溶液作为制备纳米颗粒的原液，两种溶液的体积比为2:8～8:2之间，在磁力转子500-600rpm搅拌2-3min充分混合，最终得到混合溶液b；

③将抗坏血酸AA加入到去离子水中，抗坏血酸与去离子水的质量体积比为1-2:5，设定磁力转子500-600rpm搅拌2-3min，待完全溶解即烧杯底部没有白色颗粒，得到的溶液c；

④将上述①②③中的溶液混合，设定磁力转子500-600rpm搅拌5-10min，得到混合溶液d，将得到的混合溶液d放入超声仪器中恒温超声2-4小时，超声仪器的频率为45-80Hz；所述的溶液a、溶液b、溶液c的体积比为：(1-2):(1-2):1

⑤将超声处理后的溶液d通过离心收集沉淀物，并用去离子水和乙醇洗涤多次，去除纳米颗粒表面活性剂和多余的反应物，得到Au@Pt介孔型纳米颗粒；

(2)制作Au@Pt-Hydrophilic Polyurethane的电极

将固体Au@Pt介孔纳米颗粒溶于去离子水中，Au@Pt介孔纳米颗粒与去离子水质量比为0.001-0.005:1；将聚氨酯溶于去离子水中，聚氨酯与去离子水体积比为1-2：20；取上述Au@Pt介孔纳米颗粒水溶液和聚氨酯水溶液混合，两种溶液的体积比为1-4:1；取混合溶液用等离子喷涂方法修饰到金电极上面；将电极放到干燥箱中干燥3～4小时，温度为30℃～40℃。

3.根据权利要求2所述的一种测定泪液葡萄糖浓度的无酶传感器检测方法，其特征在于：所述的溶液a、溶液b、溶液c的体积比为1:2:1。