[发明专利]一种阳离子多肽-透明质酸纳米粒及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种阳离子多肽‑透明质酸纳米粒及其制备方法与应用，所述阳离子多肽‑透明质酸纳米粒由透明质酸或透明质酸盐与阳离子多肽组装形成。本发明创造性地将透明质酸或透明质酸盐与阳离子多肽直接进行组装形成超分子纳米系统，其中透明质酸或透明质酸盐与阳离子多肽是通过疏水作用力和静电相互作用进行结合组装的，不会对多肽的活性产生显著的影响，而且这种组装方式在多肽剂型上未有报道。本发明组装得到的纳米粒稳定性好、溶血毒性低、抗酶解能力强，在药物的制备中具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种阳离子多肽-透明质酸纳米粒及其制备方法与应用。

背景技术

传统的化疗药物选择性差导致毒副作用多，并且易产生多重肿瘤耐药性，治疗效果差。作为一类被广泛研究的生物膜活性多肽，阳离子抗癌肽自身带正电荷，由于肿瘤细胞较正常细胞表面带更多负电荷，所以它能对肿瘤细胞有弱选择性；更重要的是，阳离子抗癌肽细胞杀伤作用机制的靶点是生物膜。生物膜十分重要且结构均一，受到遗传因素的影响小，许多研究认为以生物膜为杀伤靶点的药物能克服肿瘤多重耐药。

阳离子抗癌肽在疾病治疗中拥有巨大的潜力，被认为是新一代的候选抗癌药物。尽管如此，阳离子抗癌肽用于临床体内治疗的进程却停滞不前。一方面，它们的溶血毒性导致生物安全性低和治疗窗口狭窄。另一方面，多肽易被体内酶解失活。目前克服这一困难用于体内治疗的方法主要是通过改变多肽结构和载体递送。多肽结构的改变如与抗体或靶向蛋白偶联增加靶向性、多肽序列的调整等能够一定程度改善溶血性，但也会影响对癌细胞的毒性，并且酶解问题没有得到好的改善。非天然的D型氨基酸替换型氨基酸、多肽的环化、生物大分子化学修饰等能够一定程度抵抗酶解，但也会带来经济成本高和合成方法困难等问题。另外，PEG修饰的脂质纳米盘、聚合物胶束和脂质体也能够一定程度对阳离子多肽进行成药优化，但也会出现药物泄漏、成药靶向性差等新问题。设计一个合理的多肽递送方案的关键是如何提高阳离子抗癌肽的靶向性和抗酶解能力，这也是解决阳离子抗癌肽成药的关键。

靶向纳米载药系统代表了一类用于精准抗癌药物的智能纳米系统，运用在阳离子抗癌肽成药上是有希望的。有研究者报道了通过阳离子双亲性多肽melittin的N端连接一条能够调控纳米结构的α-螺旋肽从而将melittin的疏水部位深埋于脂质乳剂的油相中,一定程度上能改善掉melittin的溶血情况。并且，由于纳米粒尺寸大小合适，能靶向淋巴管，激活体内免疫(Yu X,Y Dai,Y Zhao,et al.Melittin-lipid nanoparticles target tolymph nodes and elicit a systemic anti-tumor immune response[J].NatureCommunications,2020,11(1))。然而，值得注意的是，melittin多肽由于自身的溶血性很强，有极大的副作用，而脂质类载体容易出现药物泄漏的问题，文献中药物全身静脉使用剂量受限，治疗窗口还存在疑虑。还有报道将硫辛酸修饰靶向肽DMPGTVLP，形成一条新的促凋亡肽，利用金纳米颗粒构建了一个细胞凋亡诱导细胞死亡的靶向纳米颗粒平台(Akrami M,Samimi S,Alipour M,et al.Anticancer activity potential of a new pro-apoptoticpeptide-thioctic acid gold nanoparticle platform[J].Nanotechnology,2020,32(14))。由此看来，靶向纳米给药系统具有很大的前景，但同时许多问题还有待解决。

因此，如何降低多肽的溶血毒性，并提高其抗酶解能力，从而构建一种安全性高、稳定性好的多肽-纳米给药系统，成为了本领域亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种阳离子多肽-透明质酸纳米粒及其制备方法与应用。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：