[发明专利]一种生物材料的冷冻保存方法及装置

权利要求书

1.一种生物材料的冷冻保存方法，该方法包括：

采用油包水技术将待冷冻保存的生物材料包封于油相材料中，形成生物材料油滴；其中，所述生物材料包括来自人或动物的体细胞、精子、卵子、D1-D6胚胎或植物细胞；所述油相材料包括甘油、矿物油、植物油中的一种或多种；

将生物材料油滴进行冷冻保存。

2.根据权利要求1所述的生物材料的冷冻保存方法，其中，所述冷冻保存采用常规冷冻法、程序冷冻法或玻璃化冷冻法。

3.根据权利要求1所述的生物材料的冷冻保存方法，其中，采用油包水技术将待冷冻的生物材料包封于油相材料中的过程利用一种油包水液滴形成芯片进行；

所述油包水液滴形成芯片包括开设在芯片内部的生物材料流通主管道、冷冻保存剂支管道、油相材料支管道；其中：所述生物材料流通主管道的一端为生物材料进口，另一端为生物材料油滴出口；在生物材料流通主管道上，沿生物材料流经路径先后开设冷冻保存剂支管道连通口、油相材料支管道连通口；冷冻保存剂支管道的一端通过冷冻保存剂支管道连通口与生物材料流通主管道连通，另一端为冷冻保存剂进口；油相材料支管道的一端通过油相材料支管道连通口与生物材料流通主管道连通，另一端为油相材料进口；所述生物材料进口、生物材料油滴出口、冷冻保存剂进口、油相材料进口开设在芯片表面；

所述采用油包水技术将待冷冻的生物材料包封于油相材料中的过程包括：

分别向油包水液滴形成芯片的冷冻保存剂支管道注入冷冻保护剂向油包水液滴形成芯片的油相材料支管道注入油相材料，使得冷冻保护剂与油相材料在油包水液滴形成芯片的主管道内混合形成油包水液滴；优选地，所述冷冻保护剂包括蔗糖、乙酰胺、丙二醇、聚乙二醇、二甲基亚砜中的一种或多种；

将待冷冻保存的生物材料从芯片的生物材料进口注入，使得生物材料进入冷冻保护剂与油相材料形成的油包水液滴中，形成生物材料油滴。

4.根据权利要求3所述的生物材料的冷冻保存方法，其中，所述油包水液滴形成芯片的长度为20-40mm，宽度10-20mm，厚度4-10mm；

所述生物材料流通主管道的生物材料进口、生物材料油滴出口的尺寸各自独立地为口径1.5-2.5mm、深度2.5-3.5mm；各支管道的进口的尺寸各自独立地为口径1.5-2.5mm、深度2.5-3.5mm；所述生物材料流通主管道的生物材料进口、生物材料油滴出口、各支管道的进口尺寸相同或不同；

所述生物材料流通主管道、各支管道的尺寸各自独立地为宽度0.4-0.6mm、深度1.5-2.5mm；所述生物材料流通主管道、各支管道的尺寸相同或不同；

所述生物材料流通主管道的长度为15-25mm，冷冻保存剂支管道的长度为3-8mm、油相材料支管道的长度为3-8mm；

所述冷冻保存剂支管道连通口与生物材料进口之间的流向距离为3-5mm，油相材料支管道连通口与生物材料油滴出口之间的流向距离为3-5mm，冷冻保存剂支管道连通口与油相材料支管道连通口之间的流向距离为3-15mm。

5.根据权利要求3或4所述的生物材料的冷冻保存方法，其中，

冷冻保护剂的注入速度为5-15μl/s；

油相材料的注入速度为3-8μl/s；

待冷冻保存的生物材料的注入速度为1.5-2.5μl/s。

6.根据权利要求3或4所述的生物材料的冷冻保存方法，其中，

所述油包水液滴形成芯片的整体尺寸为长30mm、宽15mm、厚5mm；所述生物材料流通主管道的生物材料进口、生物材料油滴出口、各支管道的进口的尺寸均为口径2mm、深度3mm；各管道的宽度均为0.5mm、深度均为2mm；主管道长度为20mm，各支管道长度为5mm；

冷冻保护剂的注入速度为10μl/s；

油相材料的注入速度为5μl/s；

待冷冻保存的生物材料的注入速度为2μl/s。

7.根据权利要求1所述的生物材料的冷冻保存方法，其中，将生物材料油滴进行冷冻保存时，是将生物材料油滴置于冷冻载杆上，并于生物材料油滴上覆盖惰性油进行封闭，进行液氮冷冻保存。