[发明专利]一种微环境酶靶向联合抗体Fab细胞靶向载体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种微环境酶靶向联合抗体Fab细胞靶向载体及其制备方法和应用，所述靶向载体为核‑壳双层结构，以在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多肽‑PEG修饰的脂质双分子膜作为外壳，以胎盘滋养细胞表面特异性高表达的标志物抗体修饰的药物载体作为内核，所述药物载体中负载超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、调控胎盘滋养细胞功能的小分子药物、治疗基因或其组合。本发明的靶向载体可有效避免母体胎盘外其他器官和胎儿非特异性药物吸收，进而实现对胎盘内滋养细胞特异性药物的递送和功能调控。

技术领域

本发明涉及生物医学工程领域，具体涉及一种微环境酶靶向联合抗体Fab细胞靶向载体及其制备方法和应用。

背景技术

胎盘粘连是指由于胎盘的部分或全部蜕膜基底层缺失，部分乃至整个胎盘绒毛组织异常侵入子宫肌层的病理状态。严重者胎盘侵及子宫深肌层，或胎盘穿透子宫壁达子宫浆膜层甚至侵入相邻器官。该类疾病临床风险极高，围产期常造成难以控制的出血，常导致子宫肝切除，进而危及母儿生命安全。目前研究显示，前次剖宫产史、多次人流史、高龄等是导致孕妇胎盘植入发生的独立危险因素。随着2014年我国全面放开二胎生育政策，近年放开三胎政策，生育多胎的人数增加，剖宫产后瘢痕子宫再次妊娠问题显得日益突出，胎盘粘连及其相关疾病已经成为重大公共卫生问题。

虽然目前可以通过一定的影像学手段对胎盘粘连进行一定程度的预判，但是，临床上仍然没有针对该病机制，实现胎盘粘连治疗的可靠手段。但是，由于缺乏特异性的药物，即使提前诊断，也无法实现怀孕期间对该病的有效治疗。从病理机制上，胎盘粘连是表现为部分或全部蜕膜基底层缺失，部分乃至整个胎盘绒毛组织异常侵入子宫肌层的病理状态。这种异常侵入的状态，引起了胎盘在子宫壁的粘连。所以，该病发生发展的根源在于胎盘滋养细胞侵袭和EMT功能的过度激活，进而产生胎盘功能的失调。必须根据这一机制，进行胎盘功能调控，才有望改善这一临床重大问题。

胎盘滋养细胞(trophoblastcell，TB)功能失调是包括胎盘粘连在内的众多孕妇重大疾病发病的根源。例如，TB的EMT功能和促血管生成功能过度激活，就是引发胎盘粘连的重要原因。已有诸多报道认为，包括滋养细胞在内的多种细胞，其EMT和侵袭转移功能与NF-κB通路的功能密切相关【Commun Biol.2020 Aug 28；3(1):475】。本团队前期研究中已经证实，黄芩苷是一种可以在细胞中实现确切抑制NF-κB通路的化合物【Biochem BiophysRes Commun.2015 Mar 13；458(3):707-713.Acta Pharmacol Sin.2021 Jan；42(1):88-96.】，可以利用该药物进行对NF-κB通路的抑制，进而实现对胎盘粘连时过度激活的滋养细胞EMT功能和侵袭能力的抑制【Placenta.2010 Nov；31(11):997-1002.d】。IGFBP2(Insulin-like growth factor binding protein 2)是一种NF-κB通路【Dig LiverDis.2020 May；52(5):573-581.】和PD-1/PD-L1相关免疫调控通路【Cancer Lett.2020 May1；477:19-30】的有效激活基因，其高表达可以促进与侵袭转移，并调控EGFR-STAT3相关的免疫耐受。利用siRNA技术对滋养细胞的IGFBP2表达进行抑制，就可以实现NF-κB通路的活性调控。我们前期研究已经发现，黄芩苷和可以抑制IGFBP2表达的siRNA在TB细胞中联合应用，可以产生对NF-κB通路的协同抑制效果，进而抑制EMT功能。所以，我们期望能够实现如上NF-κB通路调控功能相关的药物，对胎盘粘连疾病中，体内滋养细胞的有效递送和功能调控。