[发明专利]一种Grx-roGFP Gpx3-roGFP基因过表达16HBE单克隆细胞系模型在审
| 申请号： | 202111643482.9 | 申请日： | 2021-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN114525307A | 公开（公告）日： | 2022-05-24 |
| 发明（设计）人： | 李筱楠;王娜;温然 | 申请（专利权）人： | 河北医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66;C12N15/65;C12N15/62;C12N5/10;C12R1/91 |
| 代理公司： | 东莞市卓易专利代理事务所(普通合伙) 44777 | 代理人： | 陈海祥 |
| 地址： | 050013 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 grx rogfp gpx3 基因 表达 16 hbe 单克隆 细胞系 模型 | ||
【权利要求书】：
1.一种Grx-roGFP/Gpx3-roGFP基因过表达16HBE单克隆细胞系模型构建方法，其特征在于：其构建方法步骤如下：
步骤一：首先将目的基因Grx-roGFP和Gpx-roGFP克隆至慢病毒载体pLV-puro上；
步骤二：进一步用慢病毒载体pLV-W包装成慢病毒后感染16HBE细胞，并通过puromycin筛选Grx-roGFP和Gpx-roGFP基因过表达稳定细胞株，从而构建了可实时动态观察支气管上皮细胞线粒体内氧化还原动态的细胞系。
2.根据权利要求1所述的Grx-roGFP/Gpx3-roGFP基因过表达16HBE单克隆细胞系模型构建方法，其特征在于：所述步骤一的具体步骤如下：
S1：首先选取双酶切基因片段Grx-roGFP和Gpx-roGFP和载体；
S2：进一步将酶切好的Grx-roGFP和Gpx-roGFP连接到pLV-puro载体上；
S3：进一步进行PCR克隆鉴定。
3.根据权利要求1所述的Grx-roGFP/Gpx3-roGFP基因过表达16HBE单克隆细胞系模型构建方法，其特征在于：所述步骤二的具体步骤如下：
S1：首先进行质粒提取；
S2：进一步进行慢病毒包装；
S3：进一步感染慢病毒感染16HBE细胞和并进行筛选。
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