[发明专利]一种水稻雌性核不育基因工程表达载体及其应用在审
| 申请号： | 202111643733.3 | 申请日： | 2021-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN114317599A | 公开（公告）日： | 2022-04-12 |
| 发明（设计）人： | 李东宣;陈丽娟;李伟;朱骞;郭效琼;吴文斌;余卫霖;李仕川;罗迪;王天杰;王春丽 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/46;A01H1/02 |
| 代理公司： | 云南凌云律师事务所 53207 | 代理人： | 康珉 |
| 地址： | 650201 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 水稻 雌性 不育 基因工程 表达 载体 及其 应用 | ||
1.一种水稻雌性核不育基因工程表达载体(pFST::FST//p35S::BTZ-RNAi)，其特征在于，包括用于转基因水稻雌性育性互补的FST基因表达元件(FSTT)和用于转基因筛除的苯达松敏感致死的水稻CYP81A6基因的功能性RNAi元件(p35S::BTZ-RNAi)。
2.如权利要求1所述的水稻雌性核不育基因工程表达载体(pFST::FST//p35S::BTZ-RNAi)，其特征在于，所述用于转基因水稻雌性育性互补的FST基因表达元件(FSTT)的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述用于转基因筛除的苯达松敏感致死的水稻CYP81A6基因的功能性RNAi元件(p35S::BTZ-RNAi)的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种纯合的非转基因水稻雌性核不育系的繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将权利要求1或2所述的水稻雌性核不育基因工程表达载体(pFST::FST//p35S::BTZ-RNAi)导入纯合的雌性核不育(fst/fst)水稻植株，筛选获得杂合型转基因水稻，即基因工程水稻雌性核不育系(FSTT/fst)；
(2)基因工程水稻雌性核不育系(FSTT/fst)自交结实，收获T1种子；
(3)在T1种子育苗苗期，叶面喷施苯达松溶液，转基因幼苗(FSTT/FSTT和FSTT/fst)被除草剂苯达松致死筛除，分离出的纯合的非转基因水稻雌性不育幼苗(fst/fst)即为纯合的非转基因水稻雌性核不育系。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的苗期为T1种子育苗至3叶期。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的苯达松溶液的喷施浓度为1200mg/L，喷至叶面有水滴附着为止。
6.如权利要求3或4或5所述的纯合的非转基因水稻雌性核不育系繁殖的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的纯合的雌性核不育(fst/fst)水稻植株为云岭319FS植株。
7.权利要求3至6任一权利要求所述的纯合的非转基因水稻雌性核不育系的繁殖方法在水稻杂交制种中的应用。
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