[发明专利]苦瓜外泌体在制备放射心脏损伤保护的药物中的应用有效

专利信息
申请号: 202111644941.5 申请日: 2021-12-29
公开(公告)号: CN114259511B 公开(公告)日: 2023-04-25
发明(设计)人: 齐素华;崔雯雯;罗兰;蓝婷;黄琳燕;王婉;王凯旋;叶丛 申请(专利权)人: 徐州医科大学
主分类号: C12N5/04 分类号: C12N5/04;C12N5/077;A61K36/42;A61P9/00
代理公司: 徐州拉沃智佳知识产权代理有限公司 32455 代理人: 陈永宁
地址: 221004 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 苦瓜 外泌体 制备 放射 心脏 损伤 保护 药物 中的 应用
【说明书】:

发明公开苦瓜外泌体在制备放射心脏损伤保护的药物中的应用,将苦瓜外泌体与大鼠心肌细胞(H9C2)共培养并进行放射处理,MTT实验显示5‑25μg/ml的苦瓜外泌体都能促进放射后H9C2心肌细胞的细胞活力,并挑选10μg/ml作为苦瓜外泌体的使用浓度。在苦瓜外泌体10μg/ml的条件下,通过Ki‑67荧光染色证明苦瓜外泌体能促进放射后H9C2心肌细胞的增殖。通过Annexin V‑PE/7‑AAD流式凋亡实验和凋亡蛋白cleaved‑caspase3免疫印迹验证苦瓜外泌体能降低放射后H9C2心肌细胞的凋亡。DNA损伤标志物γ‑H2A.X的免疫荧光染色和蛋白质免疫印迹表明苦瓜外泌体能减少放射后H9C2心肌细胞的DNA损伤。

技术领域

本发明属于医药技术领域,具体涉及苦瓜外泌体在制备放射心脏损伤保护的药物中的应用。

背景技术

随着癌症发病率的增加,放疗已经逐渐成为治疗癌症的重要手段。而流行病学调查研究显示胸部放疗癌症患者心血管疾病风险增高。心脏经过照射后会对心脏瓣膜,血管,心室壁及心肌细胞等多方面产生影响。心脏中,内皮细胞受到刺激后活化并分泌大量趋化因子和黏附分子从而引起白细胞浸润,形成炎症微环境,最终引起细胞外基质沉积增加,造成心脏纤维化。新的研究表明辐射会引起细胞DNA损伤、氧化应激、线粒体功能障碍最终抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。

为了解决放射治疗所带来的问题,研究人员已经开发出包括化学物、合成物,天然物及植物源的辐射防护剂。但由于化学和合成物具有一定的副作用和毒性,临床使用上存在局限性。植物因其成本低、可获得性高、毒性小而受到人们的关注,成为研发放射保护剂的理想材料。苦瓜作为一种常见的蔬菜,具有食用和药用的价值。已经有研究证明,苦瓜具有抗氧化、抗炎及抗肿瘤等多重保护作用。在我们前期实验中,发现从苦瓜中提取的外泌体具有抑制肿瘤增殖的作用,而苦瓜外泌体做为放射保护剂的研究尚未见报道。

发明内容

针对现有技术中的不足之处,本发明提供苦瓜外泌体在制备放射心脏损伤保护的药物中的应用。

为了达到上述目的,本发明提供苦瓜外泌体在制备放射心脏损伤保护的药物中的应用。

具体的,所述应用为苦瓜外泌体在制备用于促进放射后H9C2心肌细胞的细胞活力的药物中的应用。

具体的,所述应用为苦瓜外泌体在制备用于促进放射后H9C2心肌细胞的增殖的药物中的应用。

具体的,所述应用为苦瓜外泌体在制备用于降低放射后H9C2心肌细胞的凋亡的药物中的应用。

具体的,所述应用为苦瓜外泌体在制备用于减少放射后H9C2心肌细胞的DNA损伤的药物中的应用。

将苦瓜外泌体与大鼠心肌细胞(H9C2)共培养并进行放射处理,MTT实验显示5-25μg/ml的苦瓜外泌体都能促进放射后H9C2心肌细胞的细胞活力,并挑选10μg/ml作为苦瓜外泌体的使用浓度。在苦瓜外泌体10μg/ml的条件下,通过Ki-67荧光染色证明苦瓜外泌体能促进放射后H9C2心肌细胞的增殖。通过Annexin V-PE/7-AAD流式凋亡实验和凋亡蛋白cleaved-caspase3免疫印迹验证苦瓜外泌体能降低放射后H9C2心肌细胞的凋亡。DNA损伤标志物γ-H2A.X的免疫荧光染色和蛋白质免疫印迹表明苦瓜外泌体能减少放射后H9C2心肌细胞的DNA损伤。

有益效果:本发明提取的苦瓜外泌体能够明显的提高放射后H9C2心肌细胞的增殖并抑制放射后H9C2心肌细胞的凋亡和DNA损伤,从而达到减轻放射带来的心脏损伤的效果。

附图说明

图1为本发明H9C2心肌细胞与不同浓度苦瓜外泌体(0,0.5,5,10,25μg/ml)共培养并进行16Gy X-ray照射,48小时后用MTT实验检测细胞活力结果;图中IR代表16Gy X-ray照射,MCELNs代表苦瓜外泌体处理;

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