[发明专利]一种多功能复合探针的制备方法

权利要求书

1.一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将甲基三辛基氯化铵、甲基丙烯酸聚乙二醇酯溶于去离子水中，然后加入2-乙烯基吡啶和二乙烯基苯，搅拌升温，之后加入偶氮二异丁基脒盐酸盐溶液，继续搅拌反应，反应结束后将反应液离心处理，离心得到的沉淀采用去离子水分散，制得乳胶粒子分散体；

(2)将乳胶粒子水分散体和氯金酸溶液搅拌混合处理，之后加入二甲胺基甲硼烷溶液搅拌还原，制得改性纳米金颗粒；

(3)氮气气氛下，将二氯化铁和三氯化铁溶于去离子水中，然后升温，并加入氢氧化钠溶液进行第一次搅拌反应，反应结束后冷却至室温，将反应液过滤，制得四氧化三铁纳米颗粒，将其分散在无水乙醇中，加入APTES，进行第二次搅拌反应，反应结束后，真空干燥，制得氨基化的磁性材料；

(4)将上述氨基化的磁性材料、改性纳米金颗粒分散在去离子水中，之后加入EDC和NHS的MES缓冲液，搅拌混合处理，然后加入DNA探针分散液，搅拌处理，之后加入PBS缓冲液，静置处理，之后将混合液过滤，过滤得到的固体重新分散在PBS缓冲液中，制得多功能复合探针分散液。

2.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述偶氮二异丁基脒盐酸盐溶液的浓度为1.5wt％，所述甲基三辛基氯化铵、去离子水、甲基丙烯酸聚乙二醇酯、2-乙烯基吡啶、二乙烯基苯、偶氮二异丁基脒盐酸盐溶液的用量比为3g：300ml：(4-5)g：50g：(2-3)g：20ml。

3.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述搅拌升温是将溶液加热至60℃后搅拌1h；所述搅拌反应的温度为60℃，搅拌反应的时间为24h。

4.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述乳胶粒子水分散体的浓度为3wt％，氯金酸溶液的浓度为40mmol/L，二甲胺基甲硼烷溶液的浓度为13mmol/L，乳胶粒子水分散体、氯金酸溶液、二甲胺基甲硼烷溶液的用量比为(1-2)g：5ml：(14-15)ml。

5.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述搅拌混合处理的时间为2-3h，搅拌还原处理的时间为2-3h。

6.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，氢氧化钠溶液的浓度为1.2mmol/ml，所述二氯化铁、三氯化铁、氢氧化钠的摩尔比为(1.5-1.6)：3:13。

7.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述第一次搅拌反应的温度为80-85℃，反应时间为1-2h；所述第二次搅拌反应的温度为室温，所述第二次搅拌反应的时间为7-8h。

8.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述四氧化三铁纳米颗粒、APTES的用量比为(0.1-0.2)g：0.5ml。

9.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，EDC和NHS的MES缓冲液中EDC的浓度为0.6-0.7mmol/ml，NHS的浓度为1.4-1.5mmol/L；DNA探针分散液的质量浓度为1wt％；所述氨基化的磁性材料、改性纳米金颗粒、EDC和NHS的MES缓冲液、DNA探针分散液的用量比为(0.2-0.3)g：0.015g：1ml：0.5ml。

10.根据权利要求1所述的一种多功能复合探针的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述搅拌混合处理的的时间为30min，静置处理的时间为48h。